YeaRedNucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)

YeaRed核酸染料（10,000×水溶液）（同DuRed）

—EB核酸染料的无毒替代品

产品信息

产品描述

YeaRed是一种独特的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。不易挥发升华，人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明YeaRed在凝胶染色浓度下完全无诱变性，相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。YeaRed与EB具有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置（普通紫外凝胶透射仪），在300nm处紫外光激发检测即可。YeaRed适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色，可以选择胶染法或泡染法进行染色，使用非常方便和灵活。

使用方法

一、胶染法（同EB，电泳前染色）

1.         制胶时加入YeaRed 核酸染料（每50mL 琼脂糖溶液中加入5μLYeaRed10,000×水溶液）。

2.         按照常规方法进行电泳。

注意事项

1)        此方法比较节省染料，500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。

2)        由于YeaRed具有良好的热稳定性，可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将YeaRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。

3)        YeaRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

4)        含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。

5)        如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。

6)        胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

二、泡染法（电泳后染色）

1.         按照常规方法进行电泳。

2.         用H₂O将YeaRed 10,000×水溶液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。（如将15μL YeaRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H₂O中）。

3.         将凝胶小心地放入合适的容器中，缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10％聚丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30min到1h，并随聚丙烯酰胺含量增加而延长。

注意事项

1)        用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。

2)       3× YeaRed染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。

特别注意事项

1）  关于核酸染料相关产品的选择：

如果您使用紫外成像仪，建议选择YeaRed（Cat#10202ES76）-EB核酸染料的无毒替代品，具有同EB相同的光谱特性；如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测，请选择YeaGreen，在凝胶染色中是SYBR Green I的完美替代品，安全无毒。YeaGreen虽然具SYBR Green I相似的光谱特性，且在凝胶染色方面效果优于SYBR Green I，但不建议用于qPCR。建议使用专为此用途设计的SUPER GreenI（Cat#10206ES76）和RTGreen（Cat#10207ES76）。

2）   极少数情况下，质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低的问题，此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更适合。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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