Ø 关于非放射性标记技术
罗氏应用科学部是最早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。罗氏专利的地高辛产品上市近二十年,尽管有许多出色的竞争者涉足这一领域,尽管有定量PCR技术的应用,DIG系统仍然是非放射性高效标记&检测技术的首选。
Ø 地高辛技术优势
地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物(毛地黄和毛花毛地黄)中提取的类固醇物质—— Digoxigenin (DIG)。由于洋地黄植物的花和叶片Digoxigenin在自然界中的唯一来源,因此抗DIG的抗体不会与其他的生物物质结合,从而可以满足特异性标记的需要。这一点,正是DIG胜于生物素(Biotin)的地方——同样是小分子标记物,生物素广泛存在于各种组织中,对于灵敏度很高的标记检测实验来说,样品自身含有的内源生物素,就会对结果产生干扰。地高辛就能够很好地避免这个问题。
Ø 地高辛技术特点
ü 可用于标记核苷酸或蛋白质
ü 检测方法:显色法、荧光或化学发光法
ü 安全环保,不接触放射性物质,不会对环境造成污染
ü 曝光时间短,结果显示时间以分钟计算,无需几小时甚至几天的自显影过程
ü 地高辛标记的探针至少可贮存一年以上,可一次大量制备
ü 可轻松进行探针剥离和重探
Ø 应用领域
地高辛系统能够安全高效地标记DNA、RNA或是寡聚核苷酸探针,这些探针可以被广泛应用在:
ü Southern blot'' Northern blot'' dot blot
ü 菌斑杂交
ü Microarray
ü ELISA
ü 原位杂交
Ø 根据标记方法选择探针
ü 标记DNA探针
货号
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货名
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规格
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方法
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说明
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11745816910
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DIG-Nick Translation Mix
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160 µl,40次标记反应
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缺口平移法
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此方法标记的探针可以控制探针长度,一般多用于原位杂交
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11745832910
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DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I
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12次标记反应,24次杂交检测
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随机引物法
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集标记、封闭、杂交和检测于一体的试剂盒(显色法,底物为 NBT/BCIP),应用于Southern、Northern、dot及菌斑杂交
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11585614910
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DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit Ⅱ
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12次标记反应,24次杂交检测
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同上述Kit I相似,区别在于化学发光法检测,底物为CSPD
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11585550910
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PCR DIG Labeling Mix
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500ul,50次标记反应(100ul终体积)
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PCR扩增法
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此法适用于模板量少或质量不够高的情况,包含dNTPs和DIG-11-dUTP,多用于dot blot
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ü 标记RNA探针
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