来宝网 2022/3/8点击1582次
炎症性肠病(IBD)是一组慢性非特异性肠道炎症性疾病，粪便钙卫蛋白（FC）在该病的管理中是较为理想的检测标志物。但FC的检测结果易受多种因素影响，仅在取样过程中就存在诸多变异因素，其应用价值受到限制，因此如何规范FC的实验室检测是IBD诊断中重要的一环。
炎症性肠病和粪便钙卫蛋白
近年来，炎症性肠病（IBD）在我国的发病率不断升高，已经成为消化科较为常见的疾病。
炎症性肠病主要包括克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC）两种类型，临床上以腹痛、腹泻为主要消化道表现，以发热、消瘦、贫血为主要全身性表现。这些非特异性表现与肠道易激综合征极易混淆，而FC的检测却能很好的把两种病人区分开，医学研究者能通过 粪便钙卫蛋白检测的结果进行病情严重程度评估，从而减少不必要的肠镜检查。
钙卫蛋白是 S100 蛋白家族中的一种钙锌结合蛋白，其存在于中性粒细胞胞浆中，当肠道炎症通透性增加后会促进中性粒细胞向肠腔迁移，导致 粪便钙卫蛋白水平增高。FC成分较为稳定，有较好的耐热性，不易被细菌和各种酶类破坏。
在欧洲，克罗恩病以及结肠炎组织( ECCO) 以及世界胃肠病组织( WGO) 的共识指南中，粪便钙卫蛋白被认为是一种较为理想的 IBD 无创性标志物。粪便钙卫蛋白试剂盒对于IBD的诊断、活动性评估及疗效监测具有较好的临床价值，并具有试剂价廉、检测无创、患者接受程度高和操作方便等多种优点，对于减少非必需的肠镜检查，更好的提升患者体验具有重要的意义。
FC实验室规范化操作指南
然而，粪便钙卫蛋白检测目前缺少有效的外部商用质控品，患者年龄、用药及标本等因素也影响检测的准确性，这为炎症性肠病的鉴别带来一定难度。FC检测结果的有效性和可靠性与实验规范密不可分，我们除了规范取样流程，其它因素如患者年龄、用药、肠道准备及血液影响等因素也应当规范化。
标本影响因素及注意事项
标本影响因素 | 注意事项 | |
标本留取 时间 | 同一患者同一天不同时间段所排出的粪便的FC含量之间也有较大差异，排便的次数与排便 间隔的长短也会对结果产生影响 | 清晨第 1 次排便的标本推荐作为检测样本 |
标本留取 方式 | 不规范的留样却很可能对检测结果产生较大影响 | 用规范的留样杯，在留样过程中保持样品清洁，避免水分蒸发或混入水份 |
标本采样 及 萃取方式 | 粪便称重采样是采样方式的“金标准”，目前主流的商业化检测试剂盒大多采用定量萃取管对粪便进行萃取，实际操作中粪便性状多样，单一萃取管萃取法，可能无法确保定量结果的准确性 | 如对于固态便以及糊状便，可用萃取管直接进行采样，而对于水样便，则应使用移液枪定量加样。 |
不同的试剂盒所采用的定量萃取管的结构、设计原理、精密度也不尽一致，使用不同萃取管也会造成 FC 结果变化。 | 使用与试剂盒同厂家的萃取系统，减少差异。对于非常异质样的样本，建议使用涂布器或者类似的设备进行手工均匀化 | |
标本采样 位置 | 在同一标本的不同位置采样，其 FC 检测结果也会有较大差异。同一标本不同位点的 FC 检测值之间差异最大可达 23%。 | 采样时建议避开血液和黏液部分，在样本头、体、尾至少 3 个不同位置均匀取样 |
标本存储 的 时间和温度 | FC 在室温下的稳定时间尚未有一致结论，最短是 1 d，最长可以到 7 d。 | 对 FC 检测建议新鲜标本尽快送检 |
温馨提示：考虑到粪便标本的变异因素较多，各种条件对检测水平产生的影响还难以确定，在实际科研中应该进行连续多次检测，以确保结果的可靠性和有效性。
▲标本影响因素及注意事项
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德国DRG出品的EIA-5415粪便钙卫蛋白试剂盒，基于ELISA夹心法原理，可以用于定量检测粪便样品中的钙卫蛋白。该试剂盒建议与制样系统EIA-5674配套应用，以减少不同品牌萃取管差异引起的标本取样差异，更接近良好的实验效果。
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