产品介绍
FE3检测试剂盒(酶联免疫法)
通用名称:游离雌三醇检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Free Estriol ELISA
产品规格:96T
产品货号:EIA1612
产品品牌:德国DRG
注册证号:国食药监械(进)字2013第2404322号
FE3检测试剂盒预期用途
FE3检测试剂盒可用于孕妇中孕期血清游离雌三醇的体外定量检测。雌三醇(E3)是由孕期胎盘生成的主要雌激素,游离E3通过胎盘进入母亲的血循环,在那里很快降解为葡糖苷酸和硫酸盐衍生物以便于排泄。雌三醇在母亲血液中的半衰期只有20-30分钟,因此可以方便快捷的评价最近的胎儿状态。血浆雌三醇水平稳定地升高且在孕晚期(28-40周)升高得最快。胎盘雌三醇的产生突然减少将导致母亲血清的游离雌三醇快速降低,测定游离雌三醇比测定血清总E3或尿中E3有许多可能的优势,游离雌三醇水平与母亲的肝肾功能无关,也不受某些抗体的影响,因此游离雌三醇更准确地反映糖尿病孕妇胎儿的结果。因为游离雌三醇不会发生任何水解,所以我们可以更快得到实验结果。
FE3检测试剂盒检测原理
DRG公司的雌三醇(游离的)酶免试剂盒是一种基于竞争法原理的固相酶免吸附实验(ELISA)。微孔板内包被有能结合雌三醇分子特异性抗原位点的多抗,样本中雌三醇与HRP标记的雌三醇酶联物竞争结合微孔板上有限的抗体,洗板除去未结合的酶联物;酶联物结合量与样本浓度呈反比,加入底物液后,发生颜色反应,颜色强度与样本浓度成反比。
FE3检测试剂盒组成成分
名称 | 数量 | 成分 |
微孔板 | 12×8 | 可拆分,包被了抗雌三醇抗体(多抗) |
标准品(0-5) | 6×1ml | 即用型、浓度:0、0.3、1.2、 4、15、40ng/ml) |
酶联物 | 1×14mL | 即用型 |
底物液 | 1×14ml | 即用型 |
终止液 | 1×14ml | 含0.5M H2SO4,避免接触终止液,硫酸会灼伤皮肤 |
洗涤液 | 1×30ml | 40倍浓缩 |
所需材料(未提供)
1、标准移液器
2、可在450nm处读数的酶标仪
3、吸水纸
4、去离子水或双蒸水
5、半对数坐标纸或数据处理软件
储存条件
未开启的试剂在2-8℃下贮存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂。开封的试剂必须储存于2-8℃的环境下。微孔板也必须储存于2-8℃的环境下。一旦打开包装袋,必须将它小心的密封起来
样品要求
此检测试剂盒将用到血清,请不要使用溶血,黄疸血或脂血样品。注意:含叠淡钠的样品不能用于此实验。
样品采集
血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下离心分离血清。未完全凝血前请勿离心,接受了抗凝剂治疗的病人样品可能需要更长的凝血时间。
样品的储存
实验开始前应用盖子将样品密封好,2-8℃下可存放5天。如果将样品冻存于-20℃的环境下则可将其存放更长时间。解冻的样本在实验之前必须要上下倒置几次。
样品的稀释
在第一次实验中,hCG浓度高于最高标准品的样品应当在实验前用样本稀释液进行稀释。在计算浓度时,应当把此稀释因子考虑进去。
例如:
1、按1:10稀释: 10μL的血清+90μL的零标准品(充分混合)。
2、按1:100稀释:10μL稀释好的a)+90μL的零标准品(充分混合)。
检测方法
●试剂准备
●实验前将所有试剂平衡至室温
●洗涤浓缩液:
●30ml的浓缩洗涤液+1170ml的去离子水混合,终体积1200ml,即用洗涤液
●稀释的洗涤液在室温下可保存2周
FE3检测试剂盒检测步骤
1、将试验所需板条固定于板架上
2、将10μl标准品,质控品和样本加入到相应微孔中
3、每孔加100μl 的酶联物,混合10秒,完全混合很重要
4、室温下温育60分钟。
5、弃去孔内反应液,每孔用400μl洗涤液洗板4次,吸水纸上拍干
6、在每一微孔中加入100μl TMB底物液。
7、室温温育30分钟。
8、在每一微孔中加入100μl终止液。
9、加入终止液10min内在450±10nm处读取OD值
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