Hieff? Multiplex PCR Kit
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Hieff? Multiplex PCR Kit | 13279ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff? Multiplex PCR Kit | 13279ES76 | 500 T | 3165.00 |
产品描述
本产品适用于多重PCR实验。Hieff? Multiplex PCR Kit以多重PCR酶制剂与2×扩增缓冲液为组分的试剂盒，可快速便捷地用于PCR反应，具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点，可以对20对及以上的引物特异、均一地进行扩增反应。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 |
13279ES60 (100 T) | 13279ES76 (500 T) |
13279-A | Hieff? Multiplex PCR Enzyme | 100 μL | 500 μL |
13279-B | 2×Hieff? Multiplex PCR Buffer | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
【注】:13279-A组分避免反复冻融。
运输与保存
冰袋运输。-20℃储存，有效期1年。
反应体系
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
2×Hieff? Multiplex PCR Buffer | 25 | 1× |
Hieff? Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA总量：1 ng-200 ng | - |
无菌超纯水 | up to 50 | - |
【注】 1）上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度，可根据具体实验情况进行调整最适浓度。
2）每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。
3）2×Hieff? Multiplex PCR Buffer中已经包含扩增所需要的Mg2+、dNTP、盐离子等，无需额外添加。
扩增程序
循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 | 1 min | 1 |
变性 | 94 | 30 sec | 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec |
延伸 | 72 | 60 sec/kb |
终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】 1）在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应（设置热盖温度至105℃左右）
2）使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液，可直接上样用于电泳检测。
3）延伸时间以最长扩增片段为准，可适当延长延伸时间，但要避免过长时间带来的非特异性扩增。
实验案例分享
以人基因组DNA为模板，使用10对引物进行多重PCR反应，分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反应体系配制
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
2×Hieff? Multiplex PCR Buffer | 25 | 1× |
Hieff? Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | 10 | 0.1 μM |
模板DNA | 1 | 2 ng/μL |
无菌超纯水 | up to 50 | - |
扩增程序
循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 | 1 min | 1 |
变性 | 94 | 30 sec | 35 |
退火 | 60 | 60 sec |
延伸 | 72 | 60 sec/kb |
终延伸 | 72 | 10 min | 1 |
电泳检测
2%琼脂糖凝胶；电压130 V；电泳时间30 min。
实验结果
M：100 bp DNA ladder
Lane1-2：10重PCR产物
HB200511