pNovoAvi-C专为目标蛋白C端融合Avi Tag设计,是预先用Nde I线性化的载体,可配合NovoRec?PCR产物一步无缝克隆试剂盒(CatNo.NR001)使用,用于在大肠杆菌中快速高效表达和蛋白质Biotin标记。
为保证标记效率,请选择高表达biotin化酶的宿主菌NovoBiotin BL21(CatNo.PE013),也可以用其他兼容的宿主菌表达并纯化完成后用Novoprotein Biotinylation Kit(CatNo.PE013)进行体外Biotin标记。
目的基因扩增按常规方法设计引物后,在5′端引物前添加以下序列:GAA GGA GAT ATA CAT; 3′端引物前添加:GAT GTC GTT CAG GCC。注意:5′端引物从第一个氨基酸开始(ATG), 3′端引物不要包含终止密码子。