1、 样品预处理
用50mL甲醇超声提取10 g小麦20min; 取其中4 mL过滤并吹干,先加10mL 甲醇/2 M NaCl溶液(1:1)溶解残渣,然后加入3 mL 正己烷,脱脂 2 次;移去正己烷后,将下相用水稀释至20 mL,然后用封尾C18 SPE柱进行净化。
2、 SPE 净化
SPE 柱:封尾C18,200 mg/3mL,订货号:CEC18123
活化:2 mL ACN,2 mL 水;
上样:取预处理后的样品溶液直接上样;
淋洗:2 mL 水,2 mL35%ACN;
洗脱:1 mL70%ACN。
3、 HPLC检测
检测采用赛分科技 GP-C18 色谱柱进行检测,为使检测灵敏度更高,过程中在前后两个阶段采用不同的检测波长。该方法较常规的 LC-MS法具有设备要求低、成本低廉的优点。
色谱柱:GP-C18, (5μm ,4.6×250 mm, 120 ?)
(订货号: 101185-4625)
流动相:50%ACN
柱温:室温
流速:1 mL/min
进样量:50 μL
波长:1 min~8 min(365 nm) ,8min~(220 nm)