选择光的衰减和正确的曝光时间的精确水平几乎总是一个实证行使。对于未知参数的新的细胞系,金相显微镜最好的策略是衰减尽可能的轻,显微镜价格适用于非常短的曝光时间,体视显微镜亚细胞结构,使刚刚获得的图像中可见。一个良好的开端,是一个为1.0的光密度和曝光时间为100毫秒或更少的中性密度滤光镜。激光扫描共聚焦显微镜,开始与激光功率约为1%,增加的光电倍增管的电压(增益,假如必要的话)。使用像素停留时间约50%,光学显微镜比那些通常会产生足够的信号电平较短。假如细胞能够容忍有鉴于此通过一项长期的实验时间推移,光照强度和曝光时间,可以慢慢增加在随后的实验中,直到一个可行的妥协方案是实现之间的噪声信号和细胞活力。应该指出,通常光线照射的总金额,一个细胞可以容忍和个人体视显微镜的曝光时间的是非之间存在一种非线性的关系。在一般情况下,细胞的健康,当暴露在非常短暂的脉冲光,长时间曝光以来,(大于半秒),经常在很长一段时间致命。
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参考:http://www.xianweijing.org 显微镜百科