如何解决色谱柱使用过程中出现的问题（湖南/浙江液相色谱仪分析仪器）
一、保留值与分离度重现性不好原因分析（湖南/浙江液相色谱仪分析仪器）
原因 表现
不同色谱柱间差异使用期间柱的变化 填料，键合相不同柱床破坏键合相丢失硅胶基质溶解，强保留分堆积堵塞 保留因子（K）分离子（）柱效（N）
保留因子（K）柱效（N）
柱外效应 系统差易，进样量大，进样0与色谱柱之间，色谱柱与检测器之间管路太长，检测器流通池体积大，接头死体积大等 注效（N）
问题 原因 表现
分离效果变差 流动相组分改变 保留因子（K）柱效变化很小
流速改变 保留因子（K） 分离因子
温度改变 保留因子（K）柱效变化很小
柱平衡慢 重新平衡时间不够 保留因子（K）柱效变化很小
柱超载 样品量太大 保留因子（K） 注效（N）
二 、造成色谱峰（不对称）拖尾的原因（湖南/浙江液相色谱仪分析仪器）
1.色谱柱本身填装问题，筷板堵塞或填料塌陷
2.柱头有污染；
3样本超载；
4样品溶剂不合适]
5.柱外效应
6化学或二次保留（硅基）效应
7缓冲容量不足或不合适
8重金属污染
三、如何解决峰形拖尾的问题（湖南/浙江液相色谱仪分析仪器）
A. 与化学有关的拖尾问题
1 .流动相中，加入30MM的三乙胺（用与碱性化合物）或醋酸胺（用与酸性化合物），未知化合物加醋酸三乙胺
2如然拖尾，将三乙胺换为二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；
3.降低进样量至〈1UG。
B．与色谱柱有管的拖尾问题
1如柱头处有强保留的样品组分积聚，反相柱可用20倍柱体积的96%的二碌甲烷与4%甲醇，家1%氢氧化铵混合液冲洗，正向柱可用甲醇冲洗。
2.使用保护柱
C.与HPLC 系统有关的蜂拖尾和峰加宽
1.进样体积过大，通常〈25UL〉
2.进样0与色谱柱及检测器之间的管路体积过大（最佳连接管应〈20CM，内径为0.007〉
3检测器流通池的体积过大
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