患者男,诊断为右角膜穿孔伤及右眼内炎。第2天取右眼分泌物做细菌培养,结果分离出1株粘液水滴样菌落的肺炎链球菌。按药敏试验结果采用青霉素抗感染治疗,20天后痊愈出院。
细菌鉴定:标本接种于羊血平皿,烛缸,35℃培养24小时,血平皿上长出草绿色溶血、凸起、湿润、发亮,边缘不规则,大小不一致半透明淡灰白色粘液水滴样菌落。接种原始部位及划线一、二区菌落相互融合成片,似稀薄浆糊样,接种环触之不拉成丝。革兰染色阳性球菌,矛头状或散在分布,链状少见。赫氏荚膜染色见围绕紫色菌体周边明显不着色或淡色荚膜。
生化反应:触酶阴性,Optochin敏感,分解血清菊糖,胆汁溶菌阳性,胆汁七叶苷阴性,6.5%NaCl肉汤不生长,CAMP阴性,杆菌肽耐药。用VITEK(法国生物梅里埃公司产品)鉴定系统,GPI鉴定卡,编码4400646200:肺炎链球菌。鉴定率:98%。
药敏试验:采用纸片扩散法,按美国临床实验室标准化委员会标准,质控菌株肺炎链球菌:ATCC49619。本菌对青霉素、万古霉素、头孢噻肟、克林霉素、环丙沙星、氯霉素、复方新诺明敏感;对红霉素、四环素耐药。
讨论:肺炎链球菌在羊血平皿上菌落形态通常为圆形、扁平,直径0.5 mm~1.5 mm,半透明或灰白色,边缘整齐中央凹陷的典型菌落。不难辨认。而此株肺炎链球菌培养数天后及传代3次后仍保持粘液样菌落形态,在草绿色溶血背景衬托下粘液样高凸不规则,菌落颇易误为假单胞菌类阴性杆菌的菌落。可见观察菌落形态需警觉异常表现。此外对五官科等培养标本初代培养均应置5%~10%CO2环境孵育以提高致病菌检出率。
有学者分析此类链球菌由于产生大量透明质酸荚膜多糖而形成此特殊菌落形态,粘液样菌落对病菌的毒性及治疗均有影响,此类链球菌不易被吞噬,病人病情较重。因此加强异常菌落形态致病菌的检出,避免误报或漏检十分重要。
志谢 该菌经广州军区总医院徐德兴主任,王露霞主管技师,广州市第一人民医院张惠莲技师,叶惠芬副主任技师复核鉴定。