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孙洁，王铭初，李劲榆  《实用医技杂志》

［摘要］ 目的：评价全自动生化分析仪测定β2微球蛋白(β2MG)的方法。方法：采用日常病人混合血清为标本，进行线性测定、精密度测定、回收实验、干扰实验等方法学评价实验。结果：全自动生化分析仪测定β2微球蛋白的线性范围为0 mg/L~16 mg/L，批内和批间的SD和CV均小于5%，平均回收率为98.7%；胆红素含量在497 μmol/L内无干扰。结论:全自动生化分析仪进行β2微球蛋白的测定，适用于临床。

［关键词］ β2微球蛋白；全自动生化分析仪；线性范围

Method of Examining the β2Microglobulin by Autobiochemical Ananlysis Instrument

SUN Jie，WANG Mingchu，LI Jinyu

(The First People‘s Hospital of Changde, Changde, Hu‘nan 415003， China)

Abstract：Objective To evaluate the method of examining the β2microglobulin(β2MG) by autobiochemical ananlysis instrument.Methods Put the mixedserum of normal patients as samples,take the methodevaluated test of examining the β2microglobulin by autobiochemical ananlysis instrument,such as linear and precision detecting,recycle and interference test.Result The linear range is 0 mg/L~16 mg/L;the SD and CV are all lessthan 5%;the average rate ofrecycle is 98.7%;and when the content of bilirubinis less than 497 μmol/L,there is no interference.Conclusion This method is fit for clinic.

Key words：β2microglobulin;Autobiochemical ananlysis；Linear range

    β2微球蛋白(β2MG)是一种分子量为11 800的低分子量蛋白，所有有核细胞都能产生。它存在于有核细胞的细胞膜上，是细胞中完整HLA分子的一部分。在正常生理条件下，体液中含量甚微。其主要生理作用为参与识别异己物质和提供杀伤细胞受体的作用。正常人体每日产生100 mg~200 mg β2MG，其血中浓度相当稳定，约为2 mg/L。测定体液中的β2MG，对一些疾病的筛选、诊断、疗效观察和预后评价有一定的意义［1］。本法采用β2MG免疫透射比浊试剂盒在日立7600全自动生化分析仪开展β2MG的测定，对这种方法进行了初步的评价，并进一步对实验的参数等进行了探讨。

1  材料与方法

1．1  标本  选取病人的日常检测血清标本，无溶血，无黄疸。

1．2  仪器  日本日立7600全自动生化分析仪。

1．3  试剂  北京中瑞科美生物技术有限公司生产的β2MG测定试剂盒，批号160903135/02。

1．4  原理与方法

1．4．1  原理  β2MG与包被在胶乳颗粒上的抗人β2MG抗体结合产生浊度，其浊度与β2MG浓度成正比，可用比浊法测定。

1．4．2  方法  上机测定参数：样品用量为3 μl，试剂Ⅰ用量为270 μl，试剂Ⅱ用量为30 μl，方法为两点终点法，主波长540 nm，副波长660 nm，反应为正反应，第一点读数18点，终点读数34点，温度为37 ℃。试剂盒提供的标准浓度为10 mg/L左右(以每盒所给标准浓度为准)。

2  实验与结果

2．1  线性测定  取β2MG为20 mg/L左右的无溶血、无黄疸的新鲜血清做1∶(1～7)倍稀释，上机测定，结果见表1，图1。

表1  β2MG浓度mg/L与吸光度差的关系(略)

图1  β2MG线性图(略)

结果表明，在血清β2MG含量为16 mg/L内线性良好，因此我们在实际测定中设置16 mg/L为测定上限，结果超过16 mg/L的样本，设定仪器自动稀释重做，以保证结果的准确性。

2．2  精密度测定  取无溶血、无黄疸混合血清分装20管，于-20 ℃保存备用。批内精密度，连续测定20次，结果：χ2=3.43 mg/L,SD=0.048,CV(％)=1.4％。批间精密度，连续测定20 d，结果：χ2=3.42 mg/L,SD=0.069,CV(％)=2.0％。

2 ．3  回收实验  取一混合血清(β2MG含量为1.95 mg/L)，分成三管每管0.45 ml，三管分别加入含量为10.6 mg/L、5.3 mg/L、2.65 mg/L的标准液0.05 ml测定，计算回收率分别为97.3％、99.0％、99.7％，平均回收率98.7％。

2．4  干扰实验  取一无溶血、无黄疸混合血清(β2MG含量为3.46 mg/L)0.5 ml，加入胆红素含量为497 μmol/L 的样品0.05 ml进行测定。测得β2MG值为3.47 mg/L，可见胆红素含量在497 μmol/L下无明显干扰。

2．5  参考值  随机取正常体检血清70份，测定其β2MG含量为：χ2=1.069 mg/L，SD=0.298，CV(％)=27.9％。

3  讨论

1968年由瑞典Berggard［2］首先发现β2MG至今，β2MG的应用越来越广泛。肺癌、肝癌、鼻咽癌、白血病患者MG明显升高［3～5］。β2MG主要由肾小球滤过，滤过的β2MG绝大多数为近曲小管重吸收降解，因此肾小球或肾小管功能改变时，将引起血或尿β2MG的变化。血清β2MG可反映肾小球的滤过功能，尿β2MG测定是判断肾近曲小管受损的敏感而特异的指标。早期肾损害时，血、尿β2MG已呈上升趋势。监测肾移植病人血、尿β2MG可反映移植肾的功能，预防排斥反应，估计可逆性。鉴别药物感染对监测药物性肾毒性作用方面有重要意义［6］。新生儿窒息时尿β2MG显著升高且与窒息程度正相关［7］。血清β2MG可以作为桥本氏病如突眼性甲状腺肿的诊断、疗效观察和预后判断的指标［8］；而且在心脑血管疾病、皮肤科疾病［9］、职业病、AIDS、乙型肝炎［10］等β2MG均不同程度升高，有极重要的临床意义。

测定β2MG的方法有免疫酶标法、放射免疫法、放射比浊法、免疫比浊法。免疫酶标法重复性差，适合大批量检测。放射免疫法和放射比浊法由于核素有半衰期，试剂有效期短；此外核素有放射污染、而且核素实验室的建设须经防疫部门的监督，操作人员亦须经过特殊训练，不易普及，在测定时还需要昂贵的免疫测定仪。本法采用β2MG免疫透射比浊试剂盒在日立7600全自动生化分析仪上开展β2MG的测定，不需要另外的设备，适合于批量和单个测定，无放射污染，结果稳定性、重复性满足临床要求。免疫比浊法测定MG由于使用抗人β2MG抗体，有很高的特异性，且方法简单、快速，可以在日立7600上使用。

免疫比浊法有以上优点，但也有一定缺点，尤其在抗原、抗体比例不同时，如出现前带或后带现象，对测定结果有较大的影响，故试剂Ⅰ、Ⅱ的量是经过多次试验得出。此外，在高血脂存在的情况下，脂蛋白的小颗粒可形成浊度，使测定值假性升高，因此测定时尽量不用脂血标本。

正常人血液β2MG的参考值为1 mg/L~3 mg/L，故设定仪器测定β2MG达6 mg/L时，仪器自动复查重做；当β2MG达16 mg/L时，设定自动稀释重做。每天测定前先做β2MG标准和空白测定。

本实验结果表明，β2MG在日立7600上测定的线性范围较宽，批内精密度、批间精密度、回收试验、干扰试验也完全符合要求。因此我们认为β2MG应用免疫透射比浊法可以在日立7600生化分析仪上进行定量测定，而且结果也较为理想。

参考文献：

［1］  张代民.β2微球蛋白临床应用进展［J］.临床军医杂志，2002,28(4):8183.

［2］  BERGGARD,BEAMAG.Isolatiion and properties of a low molecular wight globulin occurring in biological fluids ［J］.J Biol chem,1968,243:4095.

［3］  揭育丽，刘秀芊，唐静.鼻咽癌患者咽分泌物MG和血清MG测定的临床意义［J］.中国实验临床免疫学杂志，1999,11(2):113115.

［4］  陈名声,于文彬,卢宝壁.肺癌不同组织类型与血清MG测定的临床运用价值［J］.陕西医学杂志,1997,26(12):746.

［5］  宪莹,涂酉华,张蓉君.脑脊液MG在中枢神经系统白血病中的意义［J］.实用医学杂志,1997,13(12):791.

［6］  邵山鹰.尿微量蛋白对丁胺卡那霉素肾毒性监测的临床意义［J］.中国综合临床,1999,15(2):185.

［7］  王士梅,陈利中,陈淑英.窒息新生儿尿MG的变化及意义［J］.浙江医学,1997,19(6):323.

［8］  龙建新,徐斌,邹大进,等.Graves病患者血清MG测定的临床意义［J］.第二军医大学学报,1996,17(3):294.

［9］  周萍英,朱光斗.68例白癜风患者MG与免疫球蛋白检测［J］.临床皮肤科杂志,1997,26(1):6.

［10］  刘建平,李梦东,李奇芬.乙型肝炎病毒感染β2微球蛋白肝内表达及血清检测的意义［J］.中国实验临床免疫学杂志,1999,11(1):19.

(常德市第一人民医院，湖南 常德 415003)