产品介绍
血液RNA
著名实验室推荐:全血RNA提取
摘要: RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了,但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法,或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来,加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,如果能进行全血的提取,那就再好不过。
RNA提取应该说已经成为了一种常见的分子生物学操作步骤了,但是不少科研人员仍然烦恼着如何寻找一种最好的方法,或者找到一种适合于特殊用途方法。比如说传统的血液标本表达谱芯片实验需要先把有核细胞从全血中分离出来,加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,如果能进行全血的提取,那就再好不过。
目前有一些公司已经生产了相关试剂,可以从全血中直接提取RNA,来自中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物医学实验室,以及博奥生物芯片北京国家工程研究中心的科研人员推荐了北京百泰克生物公司的RNA全血提取试剂盒。
博奥生物芯片北京国家工程研究中心:
我们比较了不同公司的产品后,认为北京百泰克生物公司生产的TRI pure LS Reagent用于全血有核细胞的RNA抽提效果较好,可以满足基因表达谱芯片的分析要求。一般1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。
在临床上采血时,可以先把TRI pure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个月,-80℃可达半年。在此期间,可以把该裂解液运输到博奥生物公司进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。
全血样品溶解在TRI pure LS Reagent试剂后的状态:
RNA电泳图:
图1 泳道1与2,在-80度保存一个月后的提取结果。第M泳道:标准的Hela细胞RNA
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所:
百泰克公司的血液(液体样品)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)产品,在提取组织病料中细胞总RNA时,发现较本实验常用的提取方法在总RNA量和提取时间上(节约了三分之一的时间)都得到的了优化,且价格优惠,是性价比较高产品。下图是提取完后RNA凝胶电泳的比较结果(图中2为血液(液体样品)总RNA快速提取试剂盒的结果)。
以下为各公司血液RNA抽提试剂盒的对比表
百泰克公司核酸提取相关优势产品
简便、高效的血液总RNA提取试剂盒
血液总RNA提取是一个比较难的问题,因为血液本身90%多都是水,RNA含量少,所以提取RNA相对困难,现有市场上的大部分血液总RNA提取试剂盒都需要裂解红细胞,倒掉上清,然后再从白细胞中提取总RNA,最后还要用DNase酶进行基因组DNA的消化,整个操作时间超过一个半小时,即使有RNA提取出来,也都降解了。
百泰克创造性的推出了新一代的血液总RNA提取试剂盒,可以说是目前最简便、效率最高的血液总RNA提取试剂盒,特点如下:
1、 无需分离红细胞,直接对血液进行裂解,既简化步骤,又避免白细胞的损失
2、 无需用DNase酶进行基因组DNA的消化
3、 步骤简单,只需要半小时
4、 提取的总RNA可以直接做RT-PCR等下游实验
简便、高效、经济适用的血液基因组提取试剂盒
从血液(全血、外周血)提取基因组DNA是比较繁琐的过程,一般带离心柱试剂盒的方法只能处理1ml以内的血液,很多单位(主要是医院的中心实验室)一般都是用手提的方法提取,手提的方法很繁琐,提取时间在2.5-3小时,还需要酚/氯仿抽提、蛋白酶K消化,光蛋白酶K的成本5ml的血液提取就要5元以上,既不经济又不简便而且不环保。
百泰克创造性的推出了新一代的全血基因组提取试剂盒,可以说是目前最简便、效率最高的全血基因提取试剂盒,特点如下:
1、 无需蛋白酶K消化,极大的降低了成本,价格比手提还便宜
2、 不需要酚/氯仿抽提,保护操作者的健康
3、 操作时间在40分钟到1小时
MicroRNA提取试剂盒
半小时快速提取200nt以下小RNA,对各种不同来源的样品均能取得满意的结果,microRNA提取试剂盒采用独创的结合洗脱技术,对包括microRNA,small interfering RNA,small nulcear RNA均能很好的回收.
产品特点:
1、 高效分离小RNA,能同时分离总RNA;富集200nt以下的小RNA,增加其用于下游实验的浓度;
2、 快速——30分钟完成实验;
3、 适用于不同来源的样品.
TRIpure LS Reagent 血液(血液样本)RNA抽提试剂
详细
TRIpure LS Reagent 血液(血液样本)RNA抽提试剂
产品编号 包装
RP1101 50 ml 360元
RP1102 100 ml 680元
产品说明:
TRIpure LS Reagent试剂是直接从来源于人,动物、植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。在提取血液等液体样品的RNA时按一定体积比加入该试剂即可.省去了在处理样品前离心去除液体的步骤。
使用该试剂可以同时提取DNA及蛋白质。提取的RNA样品可以用于后继的RT-PCR、Northern blot、dot杂交及体外转录等实验。回收的DNA片段可以用于PCR反应。
血液样品的保存:
为了保证提取效果,请选择新鲜的血液进行RNA的提取。在收集到血液样品后,需要加入抗凝剂。抗凝剂的选择首选EDTA,其他抗凝剂如:柠檬酸盐、肝素或者ACD也可以使用。加入抗凝剂的血液样品最好在几个小时内进行RNA提取实验。不同种类的mRNA,其半衰期也不尽相同。调控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短。因此,为了保证所提取的RNA能够包含更全面的信息,请尽量避免使用保存时间过长的血液进行RNA的提取。
基本步骤:
◆ 按照3:1的体积比例加入TRIpure LS reagent和待提取的液体样品(固体样品用水调整体积比至3:1)振荡混匀。
◆ 加入氯仿帮助有机相和水相分层。
◆ 异丙醇沉淀RNA。
◆ 漂洗RNA沉淀。
◆ RNase-free H2O重新溶解RNA沉淀。
注:本产品不需要进行红细胞裂解的步骤,更快,纯度高。
产品特点:
◆ 方便--- 不需要分离红细胞和白细胞
不需要进行另外的红细胞裂解步骤。
保存条件:
2-8℃ 避光保存一年。
提取范围:
血液、血清、血浆、病毒培养液以及任何液体形式的样品中提取RNA。
产量:
每1ml液体样品或1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.人和动物全血,15~20μg
2.人淋巴细胞(约7×107白细胞),60~70μg
3.肝和脾,6~10μg
4.肾,3~4μg
5.骨骼肌和脑组织,1~1.5μg
6.胎盘,1~4μg
7.上皮细胞(1×106 cultured cells),8~15μg
8.纤维母细胞(1×106 cultured cells),5~7μg