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产品介绍

  HIV-1 p24抗原定量检测试剂盒（酶联免疫法）

说明书

【测定原理】

本试剂盒采用夹心法原理检测人血清/血浆或培养物上清中的HIV-1 p24抗原，预先采用p24单克隆抗体包被固相酶标板。若样本中含有HIV-1 p24抗原，则与包被板结合，再与加入的生物素标记p24多克隆抗体结合，辣根过氧化物酶（HRP）标记的链亲和素（SA）再与生物素抗体结合形成复合物，洗涤除去未结合的酶结合物，加入HRP底物显色液显色，酶标仪读数，根据校准品曲线算出样本中HIV-1 p24抗原的含量。

【试剂组成】            96人份

【测定方法】

[试剂准备]

1.在开始实验之前，样品和试剂应室温（20～27℃）平衡30分钟。

2.洗涤液配制：请在使用前确保浓缩洗涤液无结晶析出，如发现有结晶析出，请放置水浴锅中加热溶解，然后在适当的洁净容器内用新鲜制备的蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1:19稀释,如30mL浓缩洗涤液加蒸馏水稀释至600mL；此溶液可在2～8℃下稳定2周。

 [操作程序]

1． 实验设计：将包被板从密封袋中取出，根据所需数量在板架上放好微孔板条。设空白对照1孔，校准品孔各2孔。

2． 加结合物1：每孔加入结合物1 25μL。

3． 加样：依次分别加入样品、校准品75μL。

4． 温育：用微量震荡器充分振荡混匀，用封板膜封盖反应板，37℃温育60分钟；

5． 洗板：取出微孔板，吸干微孔板中所有液体，每孔加入稀释好的洗涤液400μL，浸泡至少10秒，吸干。如此洗板5次，最后在干净的吸水纸上拍干。

6． 加酶：空白孔除外，每孔加入结合物2 100μL。

7． 温育：用新的封板膜封盖反应板，37℃温育30分钟。

8． 洗板：取出微孔板，如上述洗板方法洗涤5次，最后在干净的吸水纸上拍干。

9． 加底物液：每孔先加入底物显色液A  50μL（或1滴），再加入底物显色液B  50μL（或1滴）。

10. 温育：用微量振荡器充分振荡混匀，用封板膜封盖反应板，37℃温育15分钟；

11. 加终止液：每孔加入终止液50μL（或1滴），轻轻振荡混匀。

12. 读数：设定酶标仪波长于450nm处（建议用双波长检测），用空白孔调零点后测定各孔A值。