1、样本miRNA提取 所需样本量：细胞（≥106）、组织（≥300mg）、血液（≥2ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，总RNA（≥20μl，浓度≥ 50ng/μl）； 样本保存：组织样本请保存在-80oC或保存在Trizol中（液氮研磨后）或保存在RNAlater中（动物组织）； 样品运输：用冻存管保存，并用干冰或液氮运输。 相关技术服务 | 服务项目 | 内容说明 | RNA提取 | 从血液、组织、叶片等样本材料中提取总RNA | 血清RNA提取 | 从1-5ml血清中提取总RNA | 石蜡包埋组织RNA提取 | 从石蜡包埋的组织块中提取总RNA | miRNA提取 | 从细胞、血液、组织、叶片等多种样本材料中（石蜡包埋组织样本除外）提取是small RNA(<200nt)，miRNA纯度、丰度更高。 |
2、样本质量检测 如果客户给的样本是已提取好的总RNA，需满足以下条件： 完整性：1.2%琼脂糖凝胶电泳出现两条带（28s、18s RNA），其中28s RNA条带的亮度是18s RNA条带亮度的1.5~2.0倍，否则说明RNA出现了降解。如果出现弥散片状或者条带缺失，则说明RNA样本出现严重降解，说明样本不可用； 纯度：OD260/OD280在1.8~2.1之间，比值最好为2.0（保存液为pH=7.0 的RNase free ddH2O）。DNA 应该去除干净； 浓度：最低浓度不低于200ng/μl，每个样品总量不少于10μg； 保存条件：要溶解在H20或TE (pH 8.0)，用冻存管保存，并用干冰或液氮运输;。 注：建议在条件允许情况下，提供可供两次样品制备的量，以确保实验质量及延续性。 3、反转录 miRNA的cDNA第一链合成有两种方法： 加尾法 茎环法 4、荧光定量检测 SYBR Green I 法 Taqman探针法 | 
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