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水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定—高效液相色谱法

样品前处理
? 准确称取样品10 g，置于50 mL离心管中，先后加入提取剂1及10mL提取剂2，漩涡混合后于40℃摇床振摇或超声30min，于6000 r/min离心10 min。
? 取出上清液，再加入10mL提取剂2，重复提取一遍，合并上清液于50mL离心管中。
   加入衍生化试剂0.5mL及催化剂0.5mL后混匀，于40℃摇床振摇或超声60min，取出冷至室温，备用。

SPE净化

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液相色谱条件
a)  色谱柱：ＣＮ柱，250 mm×4.6 mm(i.d.),粒度5µm；
b)  流动相：乙腈＋异丙醇＋乙酸乙酯＋冰乙酸＋0.05%庚烷磺酸钠=5+10+5+0.1+80（V/V）；
c)  流速：1.0 mL/min；
d)  柱温：25℃；
e)  检测波长：280nm；
g)  进样量：50μL。

分析谱图

        图1  20ng/mL四种硝基呋喃代谢物标准品色谱图

                                 图2 空白虾样品色谱图

           图3 空白虾样品添加20ng/g硝代物色谱图

        图4 标品、空白虾样品、空白虾样品加标合并图

硝基呋喃类代谢物快速检验方法

—UPLC/MS/MS

样品前处理
? 准确称取样品5.00 g于50 mL离心管中，先后加入提取剂1及提取剂2(液体20.0 mL)，漩涡混合后于40℃振摇或超声30min，以6000 r/min离心5 min。
? 取上清液10mL于50 mL离心管中，加入衍生化试剂0.3mL及催化剂0.3mL后混匀，于40℃振摇或超声60 min，取出冷至室温。 

SPE净化

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液相色谱条件
a)  色谱柱：Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18 (100mm×1.0mm i.d., 1.7μm)；
b)  柱温：35℃；
c)  样品温度：22℃；
d） 流动相：A为5mmol/l乙酸胺+0.2%甲酸；B为甲醇。梯度洗脱见表1。

                     表1  梯度洗脱程序

质谱条件
a） 离子化模式：正离子API-ES；
b） 干燥气流量：8.0L/min；
c)  喷嘴压力：35Pa；
d)  萃取锥孔电压：5.00~5.25V；
e)  雾化气温度：:400~394℃；
f)  雾化气流速： 803(L/Hr)；
g)  反吹气流速：45 L/Hr；
h)  离子源温度：120～119℃；
i)  毛细管电压：2.0～１.97KV；
j) 衍生化物SIM参数，正离子模式，见表2。

                 表2  四种硝基呋喃代谢物衍生化物SIM参数，正离子模式

分析谱图

                  硝基呋喃代谢物质谱离子色谱图

详细请咨询：010-59771652