产品介绍
一.简介
1.试剂盒描述
MaxSignalR苯并芘酶联免疫试剂盒基于酶联免疫竞争原理用来检测水样、植物油、鱼虾肉类中的苯并芘药物。石油原油含有危害人体健康的多环芳烃类化合物(PAH),研究表明,石油原油中的几种多环芳烃类药物属于致癌物质,通过研究发现,正是这种致癌风险才是最潜在的健康风险。该试剂盒有以下特点:
? 高回收率(>75%)
? 高灵敏度(0.25ng/g或ppb)
? 快速的ELISA检测方法(在不考虑样品数量下只需不到2小时)。
? 高重复性。
2.试剂盒原理
MaxSignalR苯并芘酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,相关的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时,样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物,会竞争一抗,抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗,形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后,产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。
3.试剂盒组成部分和储存
(1)试剂盒包括:
试剂盒组成 | 规格 | 保存条件 |
微孔板(Bap-coated Plate) | 96孔(12×8 孔) | 2-8℃ |
苯并芘1000ppb标准品 | 1×0.8mL | 2-8℃ |
苯并芘一抗(Bap Antibody #1) | 12mL | 2-8℃ |
100×HRP-酶标二抗(HRP-Conjugated Antibody #2) | 1×250μL | 2-8℃ |
酶标二抗稀释液(Antibody #2 Diluent) | 1×20mL | 2-8℃ |
5×样品复溶液(Sample Suspension Solution) | 1×20mL | 2-8℃ |
20×浓缩洗液(Wash Solution) | 1×28mL | 2-8℃ |
终止液(Stop Buffer) | 1×14mL | 2-8℃ |
TMB底物(TMB Substrate) | 1×12mL | 2-8℃ |
苯并芘纯化试剂 | 1×10g | 2-8℃ |
(2)试剂盒的保存
本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存,有效期为一年。如果三个月内不使用试剂盒,一抗和100×酶标二抗应置于-20℃或者冷冻保藏。
(3)样品检测下限
检测物质 | 检测下限(ng/g) |
肉/鱼/虾 | 2.5 |
植物油 | 12.5 |
水样 | 0.3 |
(4)交叉反应数据
药物 | 交叉反应 % |
苯并芘(Benzo(a)pyrene) | 100 |
六氯苯(Hexachlorobenzene) | <0.1 |
六氯环二烯(Hexachlorocyclopentadiene) | <0.1 |
甲氧(Methoxychlor) | <0.1 |
4.其他需要而本试剂盒未提的设备或材料
? 酶标仪(450nm)
? 恒温培养箱
? 微量加样器(10、20、100和1000mL各一支)
? 匀质器
? 旋转蒸发仪或者氮吹仪
? 漩涡振荡器
? 多道枪:50-300mL
? 无水硫酸镁
? 乙腈
? 正己烷
?
三. MaxSignalR苯并芘ELISATest Kit 检测方法
1.试剂的准备
所有的试剂在使用之前应将其回温至室温,并在使用试剂前摇动几下,以保证合理的浓度。
(1)1×酶标二抗工作液
按1:99的比例配制二抗浓缩液和二抗稀释液。举例:取100ul 的100×酶标二抗加入到9.9ml二抗稀释液中,配置成10ml的1×二抗工作液,按需要,可同比例放大或缩小。
(2)1×工作洗液
按1:19的比例配制20×浓缩洗液和双蒸馏水。举例:取10ml的20×浓缩洗液加入到190ml双蒸馏水中,配制成200ml的1×工作洗液,按需要,可同比例放大或缩小。
(3)1×样品复溶液
按1:4的比例配制5×浓缩样品复溶液和蒸馏水。举例:取1mL的5×浓缩样品复溶液加入到4mL蒸馏水中,配制成5mL的1×样品复溶液,按需要,可同比例放大或缩小。
(4)苯并芘标准液的配制
按如下表格方法在2mL离心管中从高浓度到低浓度来配制各浓度标准品。(1000ppb苯并芘标准液用100%DMF溶解所得)。