来宝网 2025/9/22点击58次
平行反应监测（Parallel Reaction Monitoring, PRM）是一种基于高分辨率、高精度质谱的离子监测技术。该技术的原理与SRM/MRM相当，但在蛋白质和肽的绝对定量测定开发中更方便。它最适合通过阿托摩尔水平检测对复杂样品中的多种蛋白质进行定量。PRM技术是一种新型的无抗体蛋白验证技术，用于对label free、iTRAQ、TMT、SILAC等相对定量蛋白质组数据进行验证，或者对复杂样品中的目标蛋白进行靶向定量分析。
PRM分析原理
PRM基于Q-Orbitrap作为代表性的四极杆高分辨率质谱平台。与一次执行一个跃迁的 SRM 不同，PRM 对前体离子的每个跃迁执行全扫描，即并行监测前体离子的所有碎片。首先，PRM采用四极杆（Q1）选择母离子，选择窗口通常为m/z≤2；然后，前体离子在碰撞室（Q2）中碎裂；最后，Orbitrap 取代了 Q3，以高分辨率和高精度扫描所有产物离子。因此，PRM技术不仅具有SRM/MRM目标的定量分析能力，而且还具有定性能力。（1）质量精度可达ppm级，比SRM/MRM更能消除背景干扰和假阳性，有效提高复杂背景下的检出限和灵敏度；(2) 产物离子全扫描，无需选择离子对和优化裂解能，更容易建立分析；(3)更宽的线性范围：提高到5-6个数量级。
图1
基本构成
质谱的基本原理是利用质谱仪将样品中的分子离子化，并根据它们在磁场中的质量/电荷比（m/z）分离和检测。其基本构成包括：
1.离子源（Ionization Source）：
将分析样品中的分子转化成离子的装置。常用的离子化方法包括电离、化学离子化、激光脱附等。
2.质量分析器（Mass Analyzer）：
根据分子的质量对其进行分离和筛选。常见的质量分析器包括飞行时间质量分析器、四极质量分析器、离子阱等。
3.检测器（Detector）：
用于测量离子流的强度和质量。检测器可以是光电倍增管、电子倍增器等。
4.数据处理系统（Data System）：
用于记录和处理质谱数据，通常与计算机系统连接，进行数据分析和解释。
PRM技术亮点
在高通量检测过程中，保证定量的灵敏度和特异性。
与SRM相比，它不需要母离子/碎片离子对，只需要母离子信息，使得实验设计更加简单。
它可以通过二次全扫描进行定性和定量分析，在复杂背景下表现出强大的抗干扰性和高分辨率。
可以根据需要选择性地掺入合成的标准肽，从而节省实验成本。
PRM技术具有出色的重现性，确保多次重复测试结果的稳定性。
