来宝网 2020/8/7点击1183次
蛋白质的一级序列决定了蛋白质的高级结构，影响蛋白质的功能。因此，我们必须对蛋白质的序列进行分析以验证蛋白质样品的完整性和正确翻译。为更好地服务于广大科研用户，百泰派克生物科技开发了全新的蛋白质测序平台，可满足各种相关的蛋白质测序需求，包括但不限于N端/C端测序、蛋白质全序列测定、蛋白质从头测序、抗体从头测序。下面介绍几项我们的特色服务。
单克隆抗体测序流程图
结合兼并引物设计，百泰派克生物科技开发了基于PCR扩增的抗体测序流程。与基于质谱的抗体测序法相比，基于PCR扩增的抗体测序法具有更高的成本效益和更少的时间消耗量大优势。
在这种方法中，百泰派克生物科技设计了兼并FR1引物，用于从杂交瘤提取的mRNA中扩增免疫球蛋白（Ig）轻链和重链可变区。为了更好地满足研究需求，百泰派克生物科技可提供全一站式服务和相应的定制服务。
测序步骤
l 从杂交瘤细胞中提取总RNA
l 将总mRNA反转录为cDNA
l 针对单克隆抗体可变区域序列设计简并引物，并扩增单克隆抗体的可变区域的轻链和重链区域DNA片段
l 将DNA片段克隆连入测序专用的质粒载体中
l 对DNA克隆字体进行测序分析
l 获得打克隆抗体可变区域DNA序列报告
技术特点
• 提供对所有常见的种属来源抗体的序列分析服务，可对轻链、重链或全长进行测序
• 高效快速的分析和交付速度
• 定制引物集，分析多个DNA克隆，确保精准高质量测序分析
• 对抗体易突变的FR1区进行序列分析
蛋白全序列测定流程图
全长序列信息对于研究生物制药的完整性和正确翻译至关重要。百泰派克生物科技将蛋白全序列测定服务分为三个步骤：将蛋白质消化成较小的肽片段；串联LC-MS/MS分析肽；MS/MS数据分析。传统的蛋白质测序一般只使用胰蛋白酶进行酶切，最终的蛋白质序列覆盖率约为60%。为了确保100%的蛋白质序列覆盖率，百泰派克生物科技使用多达6种蛋白质酶进行蛋白质消化，以消除任何有可能遗漏的肽。
应用领域
l 蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸全序列分析
l 蛋白质翻译后修饰和化学修饰分析
l 体外合成蛋白质以及重组蛋白质表达质量分析
蛋白质从头测序流程图
百泰派克生物科技使用目前市场上最先进的质谱仪Orbitrap Fusion Lumos进行从头测序，加上丰富的生物信息学分析和反序列鉴定，为高质量的序列分析提供保障。该从头测序服务也非常适合分析多种抗体，包括IgM和IgG抗体亚型，以及用FITC、生物素和Alexa等修饰的抗体。
应用领域
l 精准测定未知蛋白质/肽序列分析
l 精准测定经过商业化改造的蛋白质和酶的序列
l 精准测定稳定细胞系表达蛋白的序列
l CDR区或抗体全长的序列分析
如果您有任何其他蛋白组学、代谢组学相关服务需求，欢迎与我们联系以获取定制服务。
