来宝网 2018/8/21点击10974次
市场上流行的 MACS(磁珠分选)产品品牌为StemCell,BD,美天旎,每种MACS磁珠分选产品都有不同的优点与缺点,下面干细胞搜网来介绍下代理的三种不用品牌MACS(磁珠分选)产品;
stemcell 品牌公司MACS产品主要技术有以下几类:
一、EasySep® 磁性正选或负选细胞,不需柱子;
二、StemSep® 磁性正负分选,需要柱子;
三、RosetteSep® 免疫梯度离心分选,不需磁极,不需柱子;
四、SpinSep®负选产品 。
以下一一介绍。
一、EasySep®磁性正选或负选细胞,不需柱子
用于正、负选人或其它种类动物的细胞
EasySep® 是一种新型而高效的免疫磁珠细胞分选技术,具有单克隆抗体的特异性和无分离柱磁性系统的简便性。靶细胞表面特异性的抗原抗体反应为富集细胞提供了理论基础,而StemCell公司专利的四聚体复合物(TAC) 技术则为高纯度靶细胞的富集提供了保障。需要富集的靶细胞通过四聚体复合物与磁微粒相联结合,在EasySep® 专用磁极提供的磁场中,使靶细胞与非靶细胞分离。此方法即可用于正选,也可用于负选。
EasySep®系统的优势
为什么选用EasySep®?
1、经济,应用正选抗体
2、不需要柱子
3、高纯度
4、操作简单快速
4、FACS兼容,磁珠很小不影响流式分析
5、采用直接标记法分选人的细胞,采用间接标记法分选其它种类动物细胞
独特的EasySep® 磁极内腔可产生高强度的磁场,足以分离磁微粒标记的细胞,无需分离柱提供提供更高强度的磁场。由于磁微粒极小,不会影响靶细胞的流式分析结果,因此不需要去除。除了现有的定型产品外,客户可选择EasySep® PE、FITC或生物素分选系统与自己的PE、FITC或生物素—偶联的单抗相结合,来富集任何所需的细胞。如果您有自己的小鼠IgG1抗任何细胞的抗体, 也可以使用“Do-It-Yourself”试剂盒做成TAC,用来分选您想要的细胞。此外,还可以根据您的特殊需要,专门为您设计定做试剂盒。
用于正选小鼠的细胞标记方式
小鼠的细胞正选是采用间接标记的方式。先将小鼠的细胞与PE标记的抗靶细胞的特异性抗体结合,再采用StemCell公司的专利TAC技术将PE标记的细胞与EasySep®免疫磁珠相连(见右图)。在EasySep®专用磁极提供的磁场中,即可使靶细胞与非靶细胞分离。
您可以使用我们提供的完整的试剂盒分选小鼠的细胞,也可以选择EasySep® PE、FITC或生物素分选系统与自己的PE、FITC或生物素—偶联的单抗相结合,来富集任何所需的细胞。
用于负选小鼠的细胞标记方式
EasySep®小鼠的细胞负选也是采用间接标记的方式。先将不需要的小鼠细胞与生物素标记的抗靶细胞的特异性抗体结合,再采用StemCell公司的专利TAC技术将生物素标记的细胞与EasySep®免疫磁珠相连(见右图)。在EasySep®专用磁极提供的磁场中,即可将不需要的细胞去除。
您可以使用我们提供的完整的试剂盒分选小鼠的细胞,也可以选择EasySep® PE、FITC或生物素分选系统与自己的PE、FITC或生物素—偶联的单抗相结合,来富集任何所需的细胞。
BD 品牌公司MACS产品主要技术有以下几类:
BD™ Imag 磁珠:
· 大小在0.1-0.45mm
· 包被了BD Pharmingen生产的高质量单抗
· 磁珠已为白细胞亚群的阳性和阴性分离法所优化
· 用于BD™ IMagnet direct magnet
将包被了特异性单抗的BD IMag磁珠加入细胞悬液,磁珠特异性地与有相应抗原的细胞亚群结合,通过BD™ IMagnet direct magnet分离得到的连有BD IMag磁珠的细胞可直接用于功能试验和用流式细胞仪检测。
缺点:
对细胞造成机械压力,影响其生物学活性,不利于分离后培养
纯度低
容易阻塞FCM的喷嘴
BD IMag吸收大磁珠和小磁珠分离系统的优点,开发出直径约200nm中等大小磁珠。
技术简单,分离在普通的试管中完成
易于增大细胞用量
对细胞温和,不影响细胞功能及其分离后培养,可直接上流式
纯度高,回收率高
成本低
此外,Mouse lineage panel中biotin标记的抗体还可用于FCM分析细胞表面抗原,以及进行细胞/组织免疫荧光实验。
BD提供2种免疫磁珠:
· 包被了针对白细胞亚群的单抗的磁珠
· 包被了链霉亲和素(streptavidin)的磁珠:此种情况下,在实验系统中加入生物素标记的单抗,磁珠通过streptavidin与生物素标记的单抗结合,单抗与细胞表面相应抗原特异性结合而使细胞被磁珠间接捕获,从而达到分离。这种磁珠使研究者可根据自己需要选择生物素标记的各种单抗去分离目的细胞,应用范围更广泛,使用更灵活。
不同物种磁珠分离试剂
人: CD3, CD4, CD8, CD14, CD19;
小鼠: CD4, CD8a, CD14, CD45R/B220, CD90.2 (Thy1.2), CD11b, Ly-6G.
ë 利用Streptavidin连接的磁珠,只需选配biotin标记的所需单抗,就能分离更多种类细胞
新货聚焦:
现在,BD PMG又推出用于分离小鼠造血干细胞/祖细胞的新试剂mouse lineage panel。
其中包括5种biotin标记单抗,这些单抗能结合小鼠造血细胞的主要分化系细胞: T、B淋巴细胞,单核/巨噬细胞,粒细胞和红细胞。将这组试剂与Streptavidin Plus BD™ IMag Particles (557812) 联合使用,就能通过免疫磁性分离法去除小鼠骨髓造血细胞的主要分化系细胞,从而富集到造血干细胞和祖细胞(阴性片断)。
Mouse Lineage Panel(559971):(5×2ml/vial) 可分离109 Mouse骨髓细胞
1) Biotin-anti-mouse CD3e (CD3 e chain);
2) Biotin-anti-mouse CD11b;
3) Biotin-anti-mouse CD45R/B220;
4) Biotin-anti-mouse Ly-6G and Ly-6C (Gr-1);
5) Biotin-anti-mouse TER-119/Erythroid Cells (Ly-76)
德国miltenyi美天旎MACS微珠(MicroBeads)
德国miltenyi美天旎MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。微珠直径约有50nm,比细胞小200多倍,体积为细胞的百万分之一,光学显微镜下不可见。微珠由多聚糖和氧化铁组成,无毒性,对细胞无损伤,可以生物降解。MACS微珠与流式细胞仪兼容,不会影响细胞的光散射特性;磁性标记只占用20-30%的结合位点,不影响细胞的荧光抗体标记。此外,MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化;无需解离磁珠,可以直接进行后续实验:如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。
德国miltenyi美天旎MACS微珠主要有三种:直标微珠、间标微珠、多选微珠。其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联,在第一次阳性分选完成后,与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来,阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。
德国miltenyi美天旎MACS技术分选的CD8阳性T细胞(箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠)
德国miltenyi美天旎MACS分选柱(Separation Column)
MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器,铁珠表面有亲水包被,因此不会损伤细胞。在磁场外MACS分选柱不带有磁性,但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时,分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍,足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞;磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用,从而提高分选纯度和回收率。手动操作在30分钟内可完成,自动分选仅需2.5-10分钟,得到的细胞可立即用于后续实验。此外,大多数MACS分选柱都是无菌包装,一次性使用,可以满足细胞培养所需的无菌条件。
德国miltenyi美天旎MACS分选器(MACS Separators)
MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。与分选柱一起组成高强度的梯度磁场。根据应用范围分为研究用和临床应用的MACS分选器,根据操作方式分为手动和自动分选器。
MiniMACS分选器和OctoMACS分选器
MiniMACS分选器是专为手动分选动、植物细胞,细菌、病毒、细胞器和mRNA等分子而设计的。该设备价格低廉,快速分选,应用广泛,易于操作,是获得少量高纯度细胞的理想设备。OctoMACS分选器把8个MiniMACS分选器连在一起,可以在一台仪器上同时进行8个标本的分选。
MiniMACS
OctoMACS
MidiMACS分选器和QuadroMACS分选器
MidiMACS分选器是MiniMACS分选器的扩大版本,与LS和LD分选柱配合使用,可阳性选择或者去除大量高纯度细胞。QuadroMACS分选器把4个MidiMACS分选器连在一起,可以同时进行多个分选过程,或者同时进行多个样本分选,也可将一个大的样本分成数个部分同时分选。
MidiMACS -QuadroMACS
VarioMACS分选器
VarioMACS分选器有多种适配器,可以使用MS、LS、LD和CS分选柱。可用于阳性选择和去除分选:既可高纯度地分选出稀有细胞(如频率低至10-8),也可用来从细胞悬液中去除多达2×108非目的细胞。
SuperMACS II分选器
设计的SuperMACS II分选器专门用于大量细胞分选,一次分选的总细胞数大于1011,同时该仪器也适用于少量细胞的分选。
uperMACS II分选器备有三个适配器,除了μ分选柱和autoMACS分选柱外,其它所有各型MACS分选柱均可用于SuperMACS II分选器。
Super MACS II
μMACS分选器
μMACS分选器是为分子生物学和蛋白生化分选设计的分选器。同时容纳4个μ分选柱,可以分选出高纯度分子,如mRNA、序列特异性核酸或者蛋白。
autoMACS分选仪