来宝网 2013/5/15点击1059次
美国ZyGEM www.zygem.com
美国ZyGEM公司是一家著名生物技术公司，凭借其在新西兰研发中心所拥有的独特生物资源，以及从极端环境收集独一无二微生物群的核心技术，而处于世界领先地位。ZyGEM团队在国际生物技术产业的商业、技术与操作上，拥有几十年丰富的经验。目前该公司推出一系列以来自极端环境微生物的新蛋白酶催化反应为基础的DNA提取试剂盒，包括常规prepGEM、法医forensicGEM及牲畜livestockGEM系列产品。
ZyGEM公司现推出完全不同于传统RNA提取的新型RNAGEM™核酸纯化系列产品，主要有RNAGEM™ Tissue和RNAGEM™ Tissue Plus二大类，用于从哺乳动物细胞、激光捕获微组织以及流式细胞检测样本如巨噬细胞等快速自动化提取RNA。
RNA提取实验已经是大家耳熟能详的基础生物学实验了，目前有关RNA提取的试剂盒产品也是五花八门，各具特色，我们也都知道，从原始样本到试剂盒操作提取'' 到核酸的步骤越多，无疑最后得到的数据相对于样本的真实性偏离得越远，那么有没有什么方法能打破这个局限性，尽量省去中间操作步骤而减少实验误差呢？又或许您手头正有一批成百上千个样本正要提取RNA用于下游实验，但又没有条件能用到核酸自动纯化仪而且课题经费限制不能买与之配套的昂贵的纯化试剂盒。所以，有没有既简便又实惠的纯化试剂盒能满足以上的要求呢？现在，我们非常肯定地告诉您答案：有。上海起福向您推荐Zygem公司生产的RNAGEM™核酸纯化系列产品，轻松解决上述所有问题。
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ZyGEM公司现推出完全不同于传统RNA提取的新型RNAGEM™核酸纯化系列产品，主要有RNAGEM™ Tissue和RNAGEM™ Tissue Plus二大类，用于从哺乳动物细胞、激光捕获微组织以及流式细胞检测样本如巨噬细胞等快速自动化提取RNA。所有的反应均在PCR管中进行，单管封闭操作，仅需控制温度，整个过程只需20分钟，中途无需过柱离心等烦琐步骤，非常适合大规模自动化提取。所得的RNA无需纯化，可直接用于RT-PCR。
一、核心技术
RNAGEM™ Tissue产品核心技术源于Zygem公司独一无二的酶的催化反应：EA1 蛋白酶，一种来自于新西兰Mount Erebus极端环境微生物的蛋白酶。 该蛋白酶的特点：
ü 属于金属蛋白酶（Metalloproteinase ）
Ø 在pH6.7时，具有最佳活性
ü 在75°C具有最佳蛋白酶活性
Ø 在75°C放置7天，没有任何活性损失
Ø 在85°C的半衰期为1小时
Ø 在95°C的半衰期为10分钟（5 mM CaCl2）
Ø 在95°C的半衰期少于1分钟（200 µM CaCl2）
ü 95°C孵育5分钟后，活性完全丧失
ü 37°C没有任何活性
EA1 蛋白酶与蛋白酶K的活性比较，下图可以明显看出，无论是在75度还是50度EA1 蛋白酶的活性远远高于蛋白酶K生物通
In a 10 minute assay'' Proteinase K at 50°C achieves only 3.7% of the specific activity of EA1 at 75°
In a 100 minute assay'' this value is reduced to 2.1%
二、产品优点
RNAGEM™核酸纯化系列产品，以其简单方便的实验操作和高质量的RNA得率，助您分析样本最真实的基因表达水平:
用于从哺乳动物细胞、激光捕获微组织以及流式细胞检测样本如巨噬细胞等快速提取RNA的方法。 生
可实现快速、自动化地从细胞中提取核酸，包括RNA和DNA。
所得的RNA无需纯化，即可直接进行RT-PCR反应。
操作步骤简单且没有原材料的损失， RNAGEM™ 甚至能够从1个细胞中提取核酸。
工作流程: 其特点为：1-2-3，即1支管子，2 步反应，第3步就可以得到用于下游反应的核酸
RNAGEM™ 是已经优化好的试剂混合物，能够有效裂解细胞、去除RNAses以及水解蛋白。RNA提取过程在75°C下进行，无需更高温度。在使用RNAGEM™ Tissue PLUS试剂盒时，当提取过程结束后，即加入DNAse， 37°C 5min孵育，激活DNAse；之后升温至75°C，激活RNAGEM酶，并且水解DNAse，而无需再加入EDTA。
Ø 操作简单：无需多步骤离心、洗涤、真空抽滤和过柱。您需要的仅仅是一台PCR仪或温度控制加热器。
Ø 高效安全：只需要5分钟时间的孵育即可。无需用到有毒有害试剂，如GITC、苯酚、异丙醇等，单管封闭的操作体系有效降低汽溶胶污染和操作失误，同时也降低实验人员暴露各种生化环境所受的危险。
Ø 高产率：RNAGEM™ 能够从10-100'' 000个细胞中提取RNA，甚至可以从单个细胞中提取RNA，并且包括小分子量RNA，同时保持极高的线性关系
Ø 无需纯化：所得的RNA可直接用于RT-PCR。
产品所有优点都只为更好地应用于科研，让实验变得更简单，更省心，更安心。
ü 无需花大量时间做样本预处理
ü 无需昂贵的大型仪器及配套试剂
ü 节省大量管和枪头的费用
ü 避免接触苯酚等毒害试剂，健康环保
ü 操作简便省时，可以快速进入下游基因表达实验，并得到100％可重复结果
ü 相比其它试剂盒RNA产量更高
ü 提取所有RNA，包括非编码RNA，如microRNA等
三、RNAGEM™与Trizol ®的比较
RNAGEM™与Trizol相比，无论是在实验操作方面还是在RNA得率方面均显示其独特优势。
Trizol方法提取需经过裂解、洗涤、沉淀等许多步骤，但RNAGEM™却集这些步骤为一体，只需一步孵育过程，即可得到高质量RNA。
• RNAGEM 基因拷贝数极好的线性关系，即使低拷贝的基因也是如此
• RNAGEM 对于少量细胞的样本量也可行，即使是单个细胞。所有试剂均与RT-PCR兼容
• 对于细胞数量少的样本，Trizol 方法明显有不足之处，RNA得率相对较低
• RNAGEM简单封闭单管操作，适合大规模自动化
• Trizol 实验中的一些步骤如沉淀或洗涤等很难统一，因此不同样本间一致性较差
RNAGEM™ out-performs Trizol® over a wide range of cell numbers
在上图中，不同Hela细胞数目和mRNA拷贝数的关系，可以看出RNAGEM具有极高的线性，不管是对高拷贝数的mRNA （ACTB）''还是低拷贝的mRNA （BRCA1）。
10-100'' 000个细胞中基因拷贝数与原始细胞量保持极好的线性关系
除了以上介绍的RNA快速提取试剂盒，北京吉奥生物还拥有该公司的DNA快速提取试剂盒，可以广泛用于法医，畜牧，及基础研究。
