来宝网 2023/7/21点击904次
TA克隆建库技术是目前商业化建库的主流方式,通常需要片段化、末修加A、接头连接、PCR扩增等实验流程,操作复杂,且建库周期长。与TA克隆建库技术相比,转座酶法建库在DNA片段化的同时给DNA片段加上测序接头,可替代TA克隆中的片段化、末修加A、接头连接步骤,在后续建库扩增过程中,一步法PCR建库就能获得完整的用于测序的文库,具有操作简便、极大缩短建库时长等优点。
图1. 基于Tn5酶的建库流程 Tn5酶作为转座酶法建库的核心酶原料,在NGS领域应用十分广泛,除了应用于DNA建库外,还可应用于快速RNA建库、ATAC、CUT&Tag、单细胞测序等技术。(点击查看详情) 翌圣ZymeEditor™酶改造平台精心打造转座酶系列产品:Tn5 Transposase(Cat#14524ES)、pA-Tn5 Transposase(Cat#14528ES)、pG-Tn5 Transposase(Cat#14530ES)以满足不同应用需求。 1、5 U投入量无核酸外切酶残留 图2.pG-Tn5 Transposase核酸外切酶残留检测 2、相同酶投入量下,片段化能力优于其它品牌 图3. pG-Tn5 Transposase片段化能力检测 3、应用于CUT&Tag建库产量更高 分别使用翌圣及品牌A相同酶量的pG-Tn5 Transposase对1000个细胞投入量样本建库,并对文库测序后的数据进行分析,结果显示翌圣pG-Tn5 Transposase文库产量高于品牌A(图4A),Mapping率相当(图4B); 染色质上的信号分布情况与品牌A一致(图5)。 图4. pG-Tn5 Transposase应用于CUT&Tag的文库产量及Mapping率 图5. pG-Tn5 Transposase应用于CUT&Tag在染色质上的信号分布 应用 定位 产品名称 产品货号 转座酶建库ATAC建库 Tn5单酶 Tn5 Transposase 14524ES 建库试剂盒 Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®(for 50 ng) 12207ES CUT&Tag建库 pA-Tn5单酶 pA-Tn5 Transposase 14528ES pG-Tn5单酶 pG-Tn5 Transposase 14530ES 建库试剂盒 Hieff NGS® G-Type In-Situ DNA Binding Profiling Library Prep Kit for Illumina 12598ES 翌圣ZymeEditor™ 酶改造定制服务 翌圣ZymeEditor™是一个酶改造底层技术平台,它基于翌圣生物多年在分子酶改造领域中的技术积累与知识拓展,该平台已具备对多种酶的多种需求进行定向改造的能力。因此,ZymeEditor™平台从2023年开始正式推出酶改造对外定制服务,可为各种应用领域(如医药、诊断、食品、化工等)的客户提供全套酶改造服务,也可以单独提供蛋白发酵及纯化工艺开发优化、规模化生产服务,以满足不同客户的需求,助力产业升级。 





图6.ZymeEditor™酶改造定制服务流程