来宝网 2023/10/19点击622次
AkrivisBio丨艾美捷代理生化和细胞分析试剂盒方案
AkrivisBio 致力于鉴别、开发和提供高质量的生物试剂和工具，这些试剂和工具在药物发现、诊断和基础研究等多个领域和应用中起着至关重要的作用。
“Akrivis”来自希腊语，意思是精确，集中体现了目的，“Bio”是应用领域。产品从各种化学，生化和酶活性分析开始。设计得更容易使用，操作更便捷，性能高效且价格更低廉，以方便更多的研究者。AkrivisBio希望看到其分析在寻找癌症、糖尿病、肥胖、神经退行性疾病和其他领域的解决方案的生化研究中发挥重要作用，力求及时地为客户提供非常好的产品。
艾美捷AkrivisBio 热门研究：
货号 名称 规格
AKB-COS-0101 Oil Red O Lipid Staining Kit To stain two plates (6- 12-, 24- or 96-well) or five 100 mm culture dishes
AKB-COS-0102 Senescence Staining Assay To stain 24-, 12-, 6-well plates
AKB-COS-0103 Live vs. Dead Cell Differentiation Staining Kit To stain 4 X 24-well plates
AKB-COS-0104 Beta-galactosidase Staining Kit To stain 20 X 12-well plates or the equivalent volume of 6 or 24-well plates.
AKB-COS-0105 Alkaline Phosphatase Staining Kit To stain 96-, 48-, 24-, 12-, 6-well plates
AKB-CPT-0101 LDH Based Cell Cytotoxicity Assay 500 reactions
AKB-CPT-0102 Crystal Violet Cell Cytotoxicity Assay 1000 wells
AKB-CPT-0103 MTT Cell Proliferation Assay 1000 wells
AKB-CPT-0104 MTS Cell Proliferation Assay 2500 wells
AKB-MA-0101 Hydroxyproline Assay 100 wells
AKB-MA-0102 Lipid Peroxidation Assay 100 wells
AKB-MA-0103 Iron Assay 100 wells
AKB-MA-0104 Calcium Assay 100 wells
AKB-MA-0105 Phosphate Assay 100 wells
AKB-MA-0106 Total Antioxidant Capacity Assay 100 wells
AKB-MA-0107 Pyruvate Kinase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0108 Superoxide Dismutase Assay 100 wells
AKB-MA-0109 Alkaline Phosphatase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0110 Triglyceride Assay 100 wells
AKB-MA-0111 Free Fatty Acid Assay 100 wells
AKB-MA-0112 Glycogen Assay 100 wells
AKB-MA-0113 ATP Assay 100 wells
AKB-MA-0114 NAD/NADH Assay 100 wells
AKB-MA-0115 Lactate Assay 100 wells
AKB-MA-0116 Alanine Aminotransferase (ALT) Assay 100 wells
AKB-MA-0117 LDH Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0118 Urea Assay 100 wells
AKB-MA-0119 Cholesterol-Cholesterol Ester Assay 100 wells
AKB-MA-0120 Aspartate Aminotransferase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0121 Creatinine Assay 100 wells
AKB-MA-0122 Glucose Assay 100 wells
AKB-MA-0123 L-Lactate Assay II 100 wells
AKB-MA-0124 HDL-LDL Cholesterol Assay 100 wells
AKB-MA-0125 Ammonia Assay 100 wells
AKB-MA-0126 NADP-NADPH Assay 100 wells
AKB-MA-0127 Acetyl CoA Assay 100 wells
AKB-MA-0128 Trypsin Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0129 Pyruvate Assay 100 wells
AKB-MA-0130 Acetate Assay 100 wells
AKB-MA-0131 Ethanol Assay 100 wells
AKB-MA-0132 Beta-hydroxybutyrate Assay 100 wells
AKB-MA-0133 Glutamate Assay 100 wells
AKB-MA-0134 Succinate Assay 100 wells
AKB-MA-0135 Myeloperoxidase Activity Assay Catalog 100 wells
AKB-MA-0136 Glycogen Assay II 100 wells
AKB-MA-0137 Glutathione Peroxidase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0138 α-Amylase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0139 Citrate Assay 100 wells
AKB-MA-0140 Ammonia Assay II 100 wells
AKB-MA-0141 α-Ketoglutarate Assay 100 wells
AKB-MA-0142 α-Galactosidase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0143 Catalase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0144 Total Carbohydrate Assay 100 wells
AKB-MA-0145 Hydrogen Peroxide Assay 100 wells
AKB-MA-0146 p300 Inhibitor Screening Assay 100 wells
AKB-MA-0147 Phenylalanine Assay 100 wells
AKB-MA-0148 D-Lactate Assay 100 wells
AKB-MA-0149 Lipase Activity Assay I 100 wells
AKB-MA-0150 Protein Carbonyl Assay 100 wells
AKB-MA-0151 Uric Acid Assay 100 wells
AKB-MA-0152 Choline/Acetylcholine Assay 100 wells
AKB-MA-0153 GAPDH Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0154 Cathepsin D-E Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0156 Neutrophil Elastase Activity Assay 100 wells
AKB-MA-0157 Branched Chain Amino Acid Assay 100 wells
AKB-PI-0101 Lipid Extraction Kit 100 isolations
AKB-PI-0102 Sample Deproteinizing Kit (TCA) 200 preparations
AKB-PI-0103 Sample Deproteinizing Kit (PCA) 200 preparations
AKB-PI-0104 Plasma Membrane Isolation Kit 50 preparations
AKB-PI-0105 Mitochondrial DNA Isolation Kit 50 isolations
AKB-COS-0101 Oil Red O Lipid Staining Kit To stain two plates (6- 12-, 24- or 96-well) or five 100 mm culture dishes
艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/AkrivisBio.shtml
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艾美捷AkrivisBio 油红O脂染色试剂盒：一种简单、廉价的方法
细胞脂质通常存在于细胞膜及其细胞器中。在那些储存脂质以产生能量或作为更复杂结构的来源的细胞中，它通常被视为主要由甘油三酯组成的液滴，尽管可能存在其他中性脂质。脂肪细胞分化为成熟细胞涉及脂滴的急剧积累。有许多脂质储存疾病（高歇氏，尼曼-皮克，法布里等），其中过量脂质的积累会导致严重的病理。油红O是一种脂溶性偶氮染料，可优先将中性脂质染成红色，因此是可视化中性脂质积累的理想选择。
AkrivisBio Oil Red O 脂质染色试剂盒还包括苏木精，用于复染细胞核蓝，是一种在显微镜下定性观察细胞培养物中生长的细胞中脂质积累的简单、廉价的方法。该试剂盒提供足够的材料来染色两个板（6-12孔、24孔或96孔）或五个100 mm培养皿。
艾美捷AkrivisBio Oil Red O 脂质染色试剂盒：
Product Name：Oil Red O Lipid Staining Kit
Catalog：COS-0101
Size：Includes reagents for staining two plates (6- 12-, 24- or 96-well) or five culture dishes (100 mm)
Sample Type：Cultured cells
Species：All
Method of Detection：Light Microscopy
Assay Type：Qualitative
Application：To visualize lipid accumulation in cultured cells under a microscope.
Storage Conditions：Room Temperature
Shipping Temperature：Room Temperature
Shelf Life：One year from the date of delivery
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名称：油红O脂染色试剂盒
目录：COS-0101
规格：包括用于染色两个板（6-12孔、24孔或96孔）或五个培养皿（100 mm）的试剂
样品类型：培养细胞
检测方法：光学显微镜
检测类型：定性的
应用：在显微镜下观察培养细胞中的脂质积累。
储存条件：在室温（RT）下储存试剂盒。
运输温度：室温
保质期：一年
AkrivisBio 油红O脂染色试剂盒组成：
PBS 50 ml NM MA-0109-A
10%福尔马林24 ml NM蓝点MA-0109-B
Oil Red O 60 mg NM MA-0109:C
Hematoxylin 24 ml琥珀色MA-0109-D
0.22μm注射器过滤器1 ea-MA-0109-E
10 ml注射器1 ea-MA-0109-F
PBS、福尔马林（10%）和苏木精：供应时即可使用。
油红O：将20毫升100%异丙醇加入装有油红O粉末的瓶子中，盖紧盖子并充分混合。让溶解过程持续20分钟。如果保持严格的上限，这种解决方案至少可以使用一年。要制作油红O染色溶液，将6.7毫升转移到15毫升的试管中，加入4.4毫升dH2O，充分混合，静置10分钟。使用前用注射器过滤溶液并过滤15-30分钟。该溶液对于一个板是足够的，并且稳定约2小时。
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艾美捷AkrivisBio 细胞衰老染色试剂盒，检测β-Gal活性
细胞衰老是细胞停止分裂的现象。衰老可由内部（氧化应激、DNA损伤等）和外部（毒素、紫外线等）因素诱导。衰老是一种生长停滞的状态，细胞在这种状态下保持活力但停止分裂。衰老细胞表现出细胞大小增加，β-半乳糖苷酶、p53和P16活性的衰老相关表达，以及基因表达模式的改变。
AkrivisBio 的衰老检测试剂盒旨在检测β-Gal活性。β-Gal主要存在于衰老细胞中，但在正常表达β-Gal的细胞（如成熟巨噬细胞）中可能出现假阳性。
艾美捷AkrivisBio 细胞衰老染色试剂盒：
Catalog：COS-0102
Size: Includes reagents for staining 24-, 12-, 6- well plates
Sample Type：Cultured Adherent Cells
Species：All
Method of Detection：Light Microscopy
Assay Type：Qualitative
Application：To detect β-Gal activity in senescent cells under a light microscope.
Storage Conditions：4°C
Shipping Temperature：Gel Pack
Shelf Life：One year from the date of delivery
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目录：COS-0102
尺寸：包括用于染色24、12、6孔板的试剂
样品类型：培养的粘附细胞
物种：全部
检测方法：光学显微镜
化验类型：定性
应用：在光学显微镜下检测衰老细胞中β-Gal的活性。
储存条件：将试剂盒储存在4°C温度下。溶解X-gal后，将溶液储存在-20°C，避光。
运输温度：凝胶包装
保质期：一年
AkrivisBio 细胞衰老染色试剂盒组成：
固定液125 ml NM COS-0102-A
X-Gal（150 mg，冻干）1小瓶绿色COS-0102-B
含液125 ml WM COS-0102-C
含补充剂1.5 ml红色COS-0102-D
-以下协议是为12孔板中的每个孔设计的。如果使用不同的板，则相应地调整体积（例如，对于6孔板，将体积加倍，对于24孔板，将体积减半）。
-制备PBS溶液（未提供）。每孔3毫升。
-X-gal溶液：X-gal具有吸湿性。在打开小瓶之前，让其达到室温30分钟。称取20 mg X-gal至琥珀色或铝箔包裹的管，加入1ml N，N-二甲基甲酰胺，制备20X储备溶液。未使用的X-gal溶液可以在–20°C（避光）下储存1-2个月。始终使用装有X-gal溶液的聚丙烯或玻璃容器。请勿使用聚苯乙烯。
-固定液、染色液和染色补充剂（100X）可在4°C下储存。
-如果使用染色溶液或染色补充液发生沉淀，将溶液加热至37°C，使沉淀物重新溶解。如果沉淀仍然存在，离心小瓶并使用上清液。
衰老检测：
1.通过在孔边缘抽吸从孔中取出培养基，并用1ml PBS洗涤细胞一次。
2.在室温下用0.5ml固定液固定细胞10-15分钟。细胞固定时准备染色。准备充分要染色的孔数的溶液。对于每口井，准备：染色溶液470µl染色补充剂5µlX-gal在25µl DMF中
3.用1ml PBS洗涤细胞两次。
4.向每个孔中加入0.5 ml的染色溶液混合物。盖住盘子。在37°C下培养过夜。
5.在显微镜下观察细胞是否出现蓝色（40–400 X）。
6.对于染色板的长期储存，去除染色溶液并向细胞中添加70%甘油。在4°C下储存。
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艾美捷AkrivisBio即用试剂-活细胞与死细胞区分染色试剂盒
在研究生长调控、细胞死亡机制和途径时，区分活细胞和死细胞是一项常见但非常重要的任务。
AkrivisBio 的活细胞与死细胞分化染色试剂盒提供即用试剂。该试剂盒结合了一种专有的细胞可渗透绿色荧光染料来染色活细胞，以及碘化丙啶（一种红色不可渗透染料）来染色所有细胞。通过荧光显微镜观察染色的细胞。
艾美捷AkrivisBio 活细胞与死细胞区分染色试剂盒：
Catalog：COS-0103
Size: Includes reagent for staining 4 x 24-well plates.
Sample Type：Adherent or Suspension Cells
Species：All
Method of Detection：Fluorescence Microscopy
Assay Type：Qualitative
Application：To stain live cells for convenient discrimination between live and dead cells visualized under a Fluorescent Microscope.
Storage Conditions：-20°C
Shipping Temperature：Gel Pack
Shelf Life：One year from the date of delivery
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目录：COS-0103
尺寸：包括用于染色的试剂4 x 24孔板。
样品类型：粘附细胞或悬浮细胞
物种：全部
检测方法：荧光显微镜
化验类型：定性
应用：对活细胞进行染色，便于在荧光显微镜下区分活细胞和死细胞。
储存和稳定性：将未开封的试剂盒存放在–20°C的温度下。染色缓冲液和全细胞染料（碘化丙啶）打开后可在4°C下储存。活细胞染料应储存在-20°C。
AkrivisBio 细胞衰老染色试剂盒试剂盒组成：
活细胞染料50μl绿色COS-0103-A
全细胞染料50μl红色COS-0103-B
染色缓冲液50 ml NM COS-0103-C
染色方案：
1.为要染色的孔的数量准备足够的染色溶液。每个孔需要0.5μl活细胞染料，0.5μl全细胞染料和0.5ml染色缓冲液。相应地扩大规模，以获得更大数量的分析。
2.通过在500 X g下温和离心5分钟来收集细胞（106）。移除/丢弃上清液。
3.加入500μl染色溶液，轻轻重悬细胞沉淀。
4.在37°C下培养15分钟。
5.将细胞悬浮液转移到载玻片上，并用玻璃盖玻片覆盖细胞悬浮液。放在显微镜台上观察。注意：直接在盖玻片上培养粘附细胞。染色时，倾斜并去除生长培养基，然后平放，涂抹0.5 ml染色液溶液并孵育15分钟。将盖玻片翻转到载玻片上，然后放在舞台上。
6.立即用荧光显微镜观察细胞，使用带通滤光片检测荧光素和罗丹明，不包括较短的波长。活细胞用具有绿色荧光的细胞可渗透的活细胞染料染色（激发488nm；发射518nm）。死细胞染色会染色活细胞和死细胞都是红色的（激发488nm；发射615nm），给出组合的黄-红色外观。
注意：不同细胞类型的染色条件各不相同，因此有必要手动处理条件以找到合适的两种染料的浓度。PI是一种可疑致癌物，因此在处理试剂时要小心。
艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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艾美捷AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色试剂盒：简单、灵敏
大肠杆菌LacZ基因是用于检测载体介导的基因转移的表达效率的常用报告基因。它也经常用于研究基因启动子调控。LacZ编码β-半乳糖苷酶，这是一种几乎完全理想的表达选择，因为它非常稳定，对蛋白水解降解具有抗性，能够利用多种底物，并且易于原位检测。
AkrivisBio 的β-半乳糖苷酶染色试剂盒是一种简单、灵敏的检测方法，它利用X-Gal（一种无色底物），产生强烈的蓝色不溶性靛蓝产物，在显微镜下很容易观察到。
艾美捷AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色试剂盒：
Catalog：COS-0104
Size: Includes reagents to stain 20 x 12-well plates or the equivalent volume of 6 or 24-well plates.
Sample Type：Adherent Cells, Suspension Cells
Species：All
Method of Detection：Light Microscopy
Assay Type：Qualitative
Application：For visualizing β-Galactosidase activity in cells under a light microscope.
Range The response is highly linear between 10000 – 100000 cells per well
Storage Conditions：-20°C
Shipping Temperature：Gel Pack
Shelf Life：One year from the date of delivery
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目录：COS-0104
尺寸：包括用于染色20 x 12孔板或等效体积的6或24孔板的试剂。
样品类型：粘附细胞、悬浮细胞
物种：全部
检测方法：光学显微镜
化验类型：定性
应用：用于在光学显微镜下观察细胞中β-半乳糖苷酶的活性。范围反应高度线性，每孔10000–100000个细胞
储存条件：-20°C
运输温度：凝胶包装
保质期：一年
AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色试剂盒组成：
固定剂125 ml NM COS-0104-A
X-Gal冻绿COS-0104-B
染色缓冲液125 ml WM COS-0104-C
染色补充1.5 ml红色COS-0104-D
用户提供的材料：
PBS~1L
DMSO或DMF
聚丙烯管，如Eppendorf和类似的带帽锥形微管。不要使用聚苯乙烯容器。70%甘油
染色方案：
A.一般考虑：
该方案是为12孔培养板中的孔设计的。如果使用其他板，则按比例增加或减少体积。
B.试剂制备：
将20 mg X-Gal溶解在1 ml DMSO或DMF中，提供20倍储备溶液。未使用的X-Gal溶液可以在–20°C下储存长达一个月。
注意：一定要使用聚丙烯容器或玻璃制作和储存X-gal。不要使用聚苯乙烯。如果发生沉淀，只需加热溶液即可重新溶解沉淀。
C.污点：
取出培养基并用1ml PBS洗涤细胞一次。在室温下用0.5毫升Fixative固定细胞10-15分钟。当细胞处于固定剂中时，仅使用聚丙烯管制备以下染色溶液。每个孔需要0.5 ml。准备足够的染色溶液，用于使用：染色缓冲液：470µl染色补充液：5µl20 mg/ml X-gal在DMF 25µl4中染色的孔数。用1ml PBS洗涤细胞两次。向每个孔中加入0.5 ml染色溶液，盖上平板，在37°C.6下孵育过夜。第二天，在显微镜下以约200倍的放大倍数观察细胞的蓝色。为了长期保存染色板，去除染色溶液并用70%甘油覆盖细胞。在4°C下储存。
艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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艾美捷AkrivisBio 碱性磷酸酶染色试剂盒染色方案
碱性磷酸酶（ALP）是一种存在于全身各种组织中的酶，包括肝脏、骨骼、肾脏和肠道。它在催化包括核苷酸和蛋白质在内的各种分子的磷酸基团水解方面发挥着至关重要的作用。ALP对许多生理过程至关重要，包括骨矿化、核酸代谢和细胞信号传导。
AkrivisBio 的碱性磷酸酶利用基于吲哚基底物的BCIP/NBT协议。在染色中，BCIP被水解为吲哚酚，这将NBT还原为深色甲酰胺。
艾美捷AkrivisBio 碱性磷酸酶染色试剂盒：
Catalog：COS-0105
Size：Includes reagents to stain 96-, 48-, 24-, 12-, 6-well plates
Sample Type：Cultured cells
Species：All
Method of Detection：Light Microscopy
Assay Type：Qualitative
Application：For visualizing ALP activity in cultured cells under a light microscope.
Storage Conditions：-20°C
Shipping Temperature：Gel Pack
Shelf Life：One year from the date of delivery
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目录：COS-0105
尺寸：包括用于染色96、48、24、12、6孔板的试剂
样品类型：培养细胞物种：全部
检测方法：光学显微镜
化验类型：定性
应用：用于在光学显微镜下观察培养细胞中ALP的活性。
储存条件：-20°C
运输温度：凝胶包装
保质期：一年
AkrivisBio 碱性磷酸酶染色试剂盒染色方案：
根据需要培养细胞。轻轻地从培养皿中取出培养基。加入300µl洗涤缓冲液，倾斜平板，用移液管轻轻取出所有洗涤缓冲液。不要使用真空吸尘器。使用多通道移液器向所有孔中添加100µl ALP Stain工作溶液。工作要迅速但要小心。轻敲平板，使细胞均匀地覆盖在所有孔中。在37°C下培养10-30分钟。小心地去除ALP染色工作溶液；每孔用300µl洗涤缓冲液轻轻洗涤2次。倾斜并用移液管移走洗涤缓冲液。加入100µl洗涤缓冲液，用光学显微镜在约200X下成像。
注意：不要将移液管直接移到细胞中。用移液管移到井边，旋转搅拌。酚红、其他培养基成分和血清不干扰AP染色方案。
文献参考：
McGadey, J., Histochemie,;23(2):180-4. 1970 (doi: 10.1007/BF00305851)
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艾美捷AkrivisBio LDH基于细胞毒性快速、高灵敏度测定
细胞死亡或细胞毒性通常通过评估质膜损伤的程度来评估。乳酸脱氢酶（LDH）是一种细胞内酶，在细胞损伤或裂解时释放到细胞外介质中，使其成为细胞毒性作用的有用指标。
AkrivisBio 的LDH细胞毒性测定试剂盒用于评估细胞膜完整性并测量细胞死亡或细胞毒性。该检测利用WST，一种四氮唑检测试剂，对受损细胞的LDH释放进行快速、高灵敏度的测量。颜色的强度与受损细胞的数量直接相关。
艾美捷AkrivisBio LDH基于细胞毒性的测定：
Catalog：CPT-0101
Size：Includes reagents for 500 reactions
Sample Type：Cells
Species：Non specific
Method of Detection：Colorimetric, OD 450 nm
Assay Type：Quantitative
Application：For the detection of LDH released from damaged cells.
Range：20000-100000 cells/100 µl in wells of a 96-well plate
Storage Conditions：4°C
Shipping Temperature：Gel Pack
Shelf Life：One year from the date of delivery
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目录：CPT-0101
尺寸：包括500个反应的试剂
样本类型：单元格
物种：非特定
检测方法：比色法，OD 450 nm
化验类型：定量
应用：用于检测受损细胞释放的LDH。范围：20000-100000个细胞/100µl，在96孔板的孔中
储存条件：4°C
运输温度：凝胶包装
保质期：一年
AkrivisBio LDH基于细胞毒性的测定组成：
WST检测试剂1 ml透明NM MA-0109-A
含量测定缓冲液50 ml NM MA-0109-B
细胞裂解液5 ml琥珀色NM MA-0109-C
停止溶液5 ml蓝色NM MA-0109-D
LDH（阳性对照）~1 U红MA-0109-E
染色方案：
1、收集细胞（粘附或悬浮液），用新鲜培养基洗涤一次，然后将2-10 x 104个100µl的细胞加入96孔板的孔中，如下所示：
a.背景对照：每孔100µl无细胞培养基，一式三份。这允许校正由于试剂或来自培养基血清的LDHbackground引起的任何颜色。必须从所有其他值中减去背景值。
b.低对照组：每孔100µl细胞，一式三份。
c.高对照组：每个孔100µl细胞，一式四份，每个孔加10µl细胞裂解液并混合。为了校正对合组的差异，可以在步骤4（如下）中使用11µl培养基。
d.测试样品：每个孔100µl细胞，一式三份，再将测试物质添加到每个孔中并混合。
注：
•胰蛋白酶或其他更温和的方法可用于分离粘附细胞。
•每个孔使用的细胞数取决于细胞类型。为了优化测定，每个孔使用2、4和8 x 104个细胞进行快速测试，然后按照测定方案确定应使用的细胞数。用10%细胞裂解液处理30分钟后，高对照应为~2OD450 nm。在约30分钟时，低对照应<0.8 OD450 nm。
•在1-2个孔中使用阳性对照（3-5µl LDH），以证明所有试剂对活性LDH酶都能正常工作。•如果试验物质未溶解在PBS中，则应通过添加相同量的溶剂进行溶剂控制，一式三份，不添加其他试验物质。
2、将细胞（5%CO2，90%湿度，37°C）孵育一段适当的处理时间，该时间由受试物质决定。培养结束后，轻轻摇动平板，以确保LDH在培养基中均匀分布。
3、以600 x g离心细胞10分钟，使细胞沉淀。
4、将透明介质溶液（10µl/孔）转移到光学透明的96孔板中。
5、向每个孔中加入100µl LDH反应混合物，混合并在室温下孵育30分钟**。
6、用读板器在450 nm处测量所有对照品和样品的吸光度。
注意：
•根据显色速率调整反应时间。可以在多个时间点读取印版，直到观察到所需的读数。高对照应为OD450 nm~2.0，而低对照应为OD 450 nm<0.8。
•可通过添加10µl停止溶液来停止反应，混合并在48小时内读取，无显著变化。保护反应不受光照和蒸发的影响。
LDH细胞毒性测定试剂盒II。Jurkat细胞如方案中所述在96孔板中孵育。使用WST探针，使用10µl培养基进行LDH测定。低控制（白色条）；高控制（黑条）。
艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/products/CPT-0101.shtml
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艾美捷AkrivisBio 结晶紫细胞毒性测定，详细测定方案
结晶紫结合作为细胞毒性的测量是检测细胞活力或药物细胞毒性的一种公认方法。结晶紫是一种三芳基甲烷染料，能与DNA等含有核糖的分子结合。通常，死细胞从细胞培养板上分离，并在洗涤步骤中去除。使用结晶紫来量化剩余粘附细胞群的DNA允许通过监测其在570nm处的吸光度来快速测量细胞活力。
AkrivisBio 的结晶紫细胞毒性试验是一种简单、灵敏的研究细胞增殖、活力或细胞毒性的试验。该测定提供了细胞存活的定量测量，并可用于评估各种治疗或化合物的细胞毒性作用。
艾美捷AkrivisBio 结晶紫细胞毒性测定：
Catalog: CPT-0102
Size: Includes reagents for 1000 wells
Sample Type: Adherent Cells
Species: Non specific
Method of Detection: Colorimetric, OD 570 nm
Assay Type: Quantitative
Application: To study cell proliferation, viability or cytotoxicity.
Range: Recommended 5000-20000 cells/well
Storage Conditions: -20°C
Shipping Temperature: Gel Pack
Shelf Life: One year from the date of delivery
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目录：CPT-0102
尺寸：包括1000#试剂
样品类型：粘附细胞
物种：非特定
检测方法：比色法，OD 570 nm
化验类型：定量
应用：研究细胞增殖、活力或细胞毒性。范围：推荐5000-20000个细胞/孔
储存条件：-20°C
运输温度：凝胶包装
保质期：一年
AkrivisBio 结晶紫细胞毒性测定组成：
结晶紫染色40 ml NM CPT-0102-A
Wash浓缩液115 ml NM CPT-0502-B
溶解液100 ml WM CPT-0102-C
Doxorbicin 100µl红色CPT-0102-D
将未开封的试剂盒储存在-20°C的温度下。在打开之前，对所有小瓶进行短暂离心。
水晶紫染色：使用前加热至RT。用11 ml 100%甲醇重新配制。回收瓶子，摇晃并静置15分钟。在-20°C下储存。浓缩洗涤液：将1份浓缩洗涤液加入9份去离子水中，制成洗涤液。储存于4°C。
溶解溶液：使用前置于室温下。可以在RT或与其他组件一起存储。阿霉素（20mM）：使用前进行RT。在-20°C下储存。
测定方案：
1、细胞培养：将粘附细胞培养至约80%的融合度。将细胞进行胰蛋白酶化并在500 X g下离心。加入5 ml生长培养基以分散细胞。使用血细胞仪测定细胞密度。如有必要，将细胞浓度调整至25000–100000/ml。将200µl细胞悬浮液添加到96孔透明平底板中，以播种5000-20000个细胞/孔。让细胞沉淀过夜并粘附在培养板上。
2、处理：使用二甲基亚砜作为溶剂制备挑战化合物。保持化合物浓度足够高以使DMSO在细胞培养物中保持在0.5%以下。向井中添加化合物。准备DMSO载体对照和仅包含生长培养基的背景对照）。作为抑制剂对照，向含有细胞的孔中加入1µl 20 mM阿霉素。将平板在细胞培养条件下（37°C，加湿培养箱，5%CO2）培养72小时
3、结晶紫染色：去除培养基。用200µl洗涤溶液洗涤细胞。洗涤应尽可能轻柔。取出尽可能多的洗涤液。向每个孔中加入50µl Crystal Violet Stain甲醇溶液，在室温下等待20分钟。培养后，取出甲醇染色溶液。用200µl洗涤液洗涤4次。第4步洗涤后，尽可能多地去除洗涤液，并将盘子风干。
4、增溶：向每个孔中加入100µl增溶溶液。在RT.5下摇动平板20分钟。
5、测量：在570nm处测量外径。
6、计算：从所有读数中减去背景控件的外径。使用以下公式计算细胞毒性百分比：
艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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