来宝网 2022/2/22点击804次
CalBioreagents丨艾美捷生物制剂丨乙酰氨基酚
对乙酰氨基酚(Paracetamol),别称泰诺林(Tylenol)、必理通(Panadol)、百服宁(Bufferin),本品是非那西丁的体内代谢产物,通过抑制下丘脑体温调节中枢前列腺素合成酶,减少前列腺素PGE1、缓激肽和组胺等的合成和释放。PGE1主要作用于神经中枢,它的减少将导致中枢体温调定点下降,体表温度感受器感觉相对较热,进而通过神经调节引起外周血管扩张、出汗而达到解热的作用,其抑制中枢神经系统前列腺素合成的作用与阿司匹林相似,但抗炎作用较弱。对血小板及凝血机制无影响。
CalBioreagents/艾美捷 乙酰氨基酚——采用个性化定制,特色设计,适用于科研人员对于乙酰氨基酚的相关研究。
CalBioreagents应用于诊断试剂盒研发和医学研究用免疫试剂,在免疫试剂和研究类领域经验丰富。研究领域包括单抗、多抗、纯化抗原、蛋白及偶联试剂。1000+精品免疫试剂,特色CA系列抗原抗体组合,ID蛋白抗体,180+验证过的抗原-抗体对组合方案(无需额外验证)。

乙酰氨基酚适应症:
用于感冒发热、关节痛、神经痛及偏头痛、癌性痛及手术后止痛。本品还可用于对阿司匹林过敏、不耐受或不适于应用阿司匹林的患者(水痘、血友病以及其他出血性疾病等)。
CalBioreagents/艾美捷 乙酰氨基酚相关参数如下:
Cat#:C094
说明:扑热息痛-牛血清白蛋白结合物
形式:以15毫米KPO4,0.85%氯化钠,pH 7.2,0.1%NaN3
存储:存储在2-8短期-20摄氏度,长期-20摄氏度
预期用途:仅用于研究用途。不用于诊断使用适用于免疫分析开发或其他应用程序。
以上就是有关CalBioreagents/艾美捷 乙酰氨基酚相关介绍。
艾美捷科技是CalBioreagents的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/CalBioreagents.shtml
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CalBioreagents丨艾美捷丨ACTH N端单克隆抗体
ACTH 即促肾上腺皮质激素(adreno-cortico-tropic-hormone)是维持肾上腺正常形态和功能的重要激素。它的合成和分泌是垂体前叶在下丘脑促皮质素释放激素(CRH)的作用下,在腺垂体嗜碱细胞内进行的。
ACTH人工合成:
从鲨、蛙、鸵鸟、哺乳动物垂体中制取的ACTH均为三十九肽。明显的结构差异反映在分子的羧端区(25~33位)。其氨端部分(1~24位)的氨基酸排列顺序较为一致,且为生物活性的中心区域。已能人工合成ACTH与其氨端区的二十四肽,后者已呈现充分的ACTH活性。ACTH除分布于垂体外,尚发现于下丘脑、肾上腺髓质、肠道与胎盘等组织。在其生物合成过程中,是从鸦片样肽-促黑激素-促皮质激素原(简称POMC)转变而来,ACTH本身又可作为α-促黑激素(α-MSH)的前体。甚至在低等无脊椎动物中亦有ACTH的类似肽。
CalBioreagents/艾美捷 ACTH N端单克隆抗体——采用个性化定制,特色设计,适用于科研人员对于ACTH的相关研究。
CalBioreagents应用于诊断试剂盒研发和医学研究用免疫试剂,在免疫试剂和研究类领域经验丰富。研究领域包括单抗、多抗、纯化抗原、蛋白及偶联试剂。1000+精品免疫试剂,特色CA系列抗原抗体组合,ID蛋白抗体,180+验证过的抗原-抗体对组合方案(无需额外验证)。

CalBioreagents/艾美捷ACTH N端单克隆抗体相关参数如下:
cat#:M435
描述:小鼠单克隆抗ACTH N末端(aa1-24)
免疫原:纯化的ACTH 1-24氨基酸序列
免疫球蛋白同型:IgG1
形态:蛋白A柱层析纯化。以PBS提供,pH 7.2,添加0.09%叠氮化钠作为防腐剂。
交叉反应性:ACTH 1-24 100% ACTH 17-39 0%
亲和常数:~5.0 E 10 L/M
储存:将抗体储存在2-8oC。等分并在-20℃下长期冷冻存储
建议使用:我们建议将此抗体与ACTH C末端结合使用抗体作为ELISA中的三明治对。
预期用途:仅用于研究用途。适用于免疫分析开发或其他应用。
以上就是有关CalBioreagents/艾美捷 ACTH N端单克隆抗体相关介绍。
艾美捷科技是CalBioreagents的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/CalBioreagents.shtml
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有效浓缩,不到2分钟,DNA浓缩试剂盒方案
艾美捷/DNA浓缩试剂盒提供了一整套必需的试剂和方法,来有效浓缩各种低浓度DNA样品(包括显微解剖样品和石蜡包埋组织)中的DNA.只需要不到2分钟,就可以得到比别的试剂盒更好的浓缩产物.本试剂盒适用于各种样品中DNA的浓缩,尤其是低浓度的样品,比如显微解剖样品、石蜡包埋组织、限制酶切产物、PCR反应物以及人工合成的微量DNA产物。
艾美捷/DNA浓缩试剂盒原则与程序:
该DNA浓缩试剂盒将Epigentek专有的DNA结合缓冲液应用于DNA样本。将样品转移到专门设计的快速旋转柱中,并用在洗涤缓冲液中,DNA很容易在8-10µl的洗脱溶液中回收。浓缩DNA是为下游应用做好准备。

DNA浓缩器Ki使用程序示意图
艾美捷/DNA浓缩试剂盒使用独特的程序和成分来高效浓缩,来自各种低浓度DNA样本的DNA,包括来自显微解剖样本和石蜡包埋组织。该套件具有以下功能:
•可用的最快程序(<2分钟)。
•浓缩DNA超纯,能有效去除污染物(盐、蛋白质、,酶、核苷酸和引物)。
•用户友好的结合溶液,不含致潮剂或其他刺激性试剂。
艾美捷/DNA浓缩试剂盒化验方案:
注:在将旋转柱放入微量离心机之前,务必盖上旋转柱。
开始前,向CA2中加入20毫升100%乙醇,制备最终洗涤缓冲液。
1.向每一体积的DNA样本中加入2体积的CA1,并充分混合。例如,添加200微升CA1至100微升DNA样本。如果所需体积小于100µl,则添加100µl的CA1。
2.将混合物转移到色谱柱中。以12000转/分的转速离心15秒。丢弃流过。将色谱柱更换至收集管(注:色谱柱的最大体积为600微升)。
3.向色谱柱中添加200µl CA2(最终洗涤缓冲液),并以12000 rpm的转速离心15分钟几秒钟。丢弃通流管,并将色谱柱更换至收集管。添加200微升将CA2注入柱中,以12000 rpm的转速离心30秒。
4.将色谱柱放入新的1.5毫升小瓶中。直接向柱状过滤器中添加6-8µl的CA3,离心至12000转/分,20秒洗脱DNA。
来源:https://www.amyjet.com/products/P-1006-2.shtml
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HRP标记-纯化兔抗鸡IgY功能与参数
辣根过氧化物酶
辣根过氧化物酶(HRP)结合物是通过改良的Nakane和Kawaoi程序制备的(J.Histochem.Ceythem.1974.22,1084)。过氧化物酶结合物通常用于免疫组织化学、免疫印迹和ELISA。亲和纯化的抗辣根过氧化物酶和结合物可用于检测辣根过氧化物酶抗原或用于含HRP试剂的信号放大。对于哺乳动物细胞的免疫染色,使用抗辣根过氧化物酶的优点是减少了背景,因为抗体不能识别在这些细胞中发现的内源性过氧化物酶样酶。
HRP易提取、价格低廉、性质稳定,耐热及有机溶剂,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失,在免疫学实验中广泛应用。
艾美捷/HRP标记-纯化兔抗鸡IgY适用于大部分免疫学实验,基于免疫电泳和/或ELISA,抗体与鸡IgY重链的Fc部分反应,但与鸡免疫球蛋白的Fab部分不反应。未检测到针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。抗体可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。
通过免疫亲和层析从抗血清中分离出完整的IgG抗体。它们有一个Fc部分和两个抗原结合Fab部分,通过二硫键连接在一起,因此它们是二价的。据报道,平均分子量约为160 kDa。抗体的整个IgG形式适用于大多数免疫检测程序,且最具成本效益。
艾美捷/HRP标记-纯化兔抗鸡IgY(IgG),Fc端二抗其它参数:
cat#:303-035-008
目标:鸡
宿主:兔子
抗体格式:全IgG
特异性:IgY(IgG),Fc片段特异性
结合物:辣根过氧化物酶
类别:全IgG亲和纯化抗体
克隆性:多克隆
物理状态:冻干固体
储存和再水化:将冻干固体储存在2-8°C下。用指示体积的dH2O再水化,如果不清楚,则用离心机进行离心。在使用当天准备工作稀释液。产品在2-8°C温度下作为未稀释液体稳定约6周。
补液后的长期储存:等分并在-70°C或更低温度下冷冻。避免反复冻融。或者,添加等量的甘油(ACS级或更好),最终浓度为50%,并作为液体储存在-20°C下。
有效期:自补液之日起一年。如果试验结果可用于预期用途,则有效期可延长。
纯度:抗体通过免疫亲和层析从抗血清中纯化,使用抗原与琼脂糖珠偶联。
缓冲液:0.01M磷酸钠,0.25M氯化钠,pH 7.6
稳定剂:15毫克/毫升牛血清白蛋白(不含IgG,不含蛋白酶)
防腐剂:无(警告:使用叠氮化钠作为防腐剂将显著抑制辣根过氧化物酶的酶活性。)
艾美捷/HRP标记-纯化兔抗鸡IgY建议的工作浓度或稀释范围:
1:500-1:5000用于免疫组织/细胞化学
1:5000-1:100000用于ELISA和带有显色底物的Western印迹
1:10000-1:200000用于ECL底物的蛋白质印迹
稀释系数以范围的形式表示,因为zui+稀释度是许多因素的函数,例如抗原密度、渗透性等。实际使用的稀释度须根据经验确定。
来源:https://www.amyjet.com/products/303-035-008.shtml
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通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠)实验
免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)是利用固定在磁珠或琼脂糖等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的方法。作为许多蛋白学相关研究的重要环节,IP可用于检测蛋白质的存在、相对丰度、蛋白表达的上下调、蛋白质稳定性及相互作用等。
Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠)实验建议:
基于传统的IP/Co-IP实验操作繁琐耗时、试剂用品种类繁多、实验结果稳定性可靠性差的痛点,Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠);该工具箱包含经优化的天然和变性裂解液、IP negative control、Protein A/G Magnetic Beads、独特的Ipkine™ 二抗,可满足大多数用户IP/Co-IP的需求。
Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠)试剂盒组分:
•非变性溶解缓冲液-25毫升
•变性溶解缓冲液-25毫升
•20×洗涤缓冲液-20毫升
•蛋白质A/G磁珠-0.45毫升
•洗脱缓冲液-2毫升
•中和缓冲液-0.2毫升
•100×蛋白酶抑制剂鸡尾酒-0.2毫升
•小鼠IgG(1 mg/mL)-30μL
•兔IgG(1 mg/mL)-30μL
•IPKine™ HRP,山羊抗鼠IgG LCS-30μL
•IPKine™ HRP,小鼠抗兔IgG LCS-30μL
Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠)特点如下:
• 高效:高效的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率,节省抗体用量;
• 便捷、通用:综合 IP/Co-IP和WB实验所需的所有必要缓冲液,可同时满足样本IP/Co-IP或WB需求;
• 可靠、稳定:包含即用型IP negative control,可排除IgG本身和目的蛋白或其它特定生物分子的非特异性结合,确保IP抗体的特异性;包含独特的IPkine™ 二抗,完美消除重链干扰。

图:从非变性裂解缓冲液中提取蛋白质,然后通过Co IP验证。而全细胞裂解物(输入)和Co-IP样本分别用Stat1单克隆抗体、Stat2多克隆抗体和GAPDH单克隆抗体通过WB进行验证。
来源:https://www.abbkine.cn/ip-co-ip-4/
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免疫共沉淀丨通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(琼脂糖)
免疫共沉淀又叫Co-IP,是利用抗原A与蛋白B结合,通过A的抗体沉淀A,再利用精制的prorein A/G预先结合到磁珠上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,磁珠上的prorein A/G就能吸附抗原,从而获得抗原A与蛋白B的复合体,之后就可以对B进行检测,从而获得蛋白质与蛋白质相互作用的信息。
免疫共沉淀的优点
(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;
(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;
(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物;
(4)能够对间接相互作用的蛋白进行捕获,比如对蛋白复合物的多种成分进行鉴定;
(5)可以研究具有修饰的目的蛋白;
(6)操作流程较为简便,不需要事先制备大规模蛋白表达文库。
免疫共沉淀的缺点
(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;
(2)不能判断直接互作还是间接互作,两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;
(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择特异的检测抗体,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性;
(4)灵敏度没有亲和色谱高;
(5)可能因为多种非特异性吸附带来假阳性结果,因此需要设置严格的对照。
免疫共沉淀(Co-IP)常见问题及注意事项
免疫共沉淀中的input是指什么?
input是阳性对照。免疫共沉淀实验中,会直接取细胞裂解液进行WB,用于验证细胞裂解液中确实存在目的蛋白,即阳性对照。
如何避免重链,轻链的影响(点击此链接详述)?
1.设计合适的IP实验;
2.选择合适种属的抗体;
3.选择特异性识别重链/轻链的二抗;
Input对照组出现假阴性结果?
1.裂解液过于剧烈,采用温和的裂解条件;
2.选择目的蛋白或相互作用蛋白含量低的样品:过表达提高目的蛋白的含量,进行免疫共沉淀;
假阳性结果?
1.增加预纯化步骤;
2.更换lgG;
3.IP后增强洗涤。
免疫共沉淀中没有检测到与目的蛋白相互作用的蛋白或检测得到的信号太弱?
1.裂解液中的去垢剂浓度太高或配方过于剧烈:此时降低去垢剂浓度或更换去垢剂种类;
2.受蛋白的亚细胞定位影响:应重新选择裂解液配方来释放目的蛋白;
3.蛋白与蛋白之间的相互作用太弱或不太稳定:应选择亲和力更高的抗体以捕获更多的目的蛋白,从而捕获更多的相互作用蛋白;
4.过表达提高目的蛋白的含量:选择目的蛋白或相互作用蛋白含量高的样品进行免疫共沉淀实验。
Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(琼脂糖):
基于传统的IP/Co-IP实验操作繁琐耗时、试剂用品种类繁多、实验结果稳定性可靠性差的痛点,Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(琼脂糖)包含经优化的天然和变性裂解液、IP negative control、Protein A/G Agarose、独特的Ipkine™ 二抗,可满足大多数用户IP/Co-IP的需求。
Abbkine/通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(琼脂糖)特点&优势:
• 高效:高效的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率,节省抗体用量;
• 便捷、通用:综合 IP/Co-IP和WB实验所需的所有必要缓冲液,可同时满足样本IP/Co-IP或WB需求;
• 可靠、稳定:包含即用型IP negative control,可排除IgG本身和目的蛋白或其它特定生物分子的非特异性结合,确保IP抗体的特异性;包含独特的IPkine™ 二抗,完美消除重链干扰。
来源:https://www.abbkine.cn/ip-co-ip-4/