来宝网 2012/8/21点击3132次
阿莫西林有关物质检测
一、实验方法
Cometro高效液相色谱系统；
色谱柱：Comasil C18 250*4.6mm，5μm；
波长：254nm；
流速：1.0ml/min；
样品：阿莫西林原料样品（约2mg/ml），对照品（20μg/ml）；
进样量：20μl
流动相：A 磷酸盐（pH=5）-乙腈=99:1；
B 磷酸盐（pH=5）-乙腈=80:20。
梯度洗脱
|
时间/min |
流动相A/% |
流动相B/% |
|
0.00 |
92 |
8 |
|
15.00 |
92 |
8 |
|
40.00 |
0 |
100 |
|
55.00 |
0 |
100 |
|
56.00 |
92 |
8 |
|
70.00 |
92 |
8 |
二、实验结果
1、阿莫西林样品
|
Channel A Results |
||||
|
Name |
Retention Time |
Area |
Theoretical plates (USP) |
Resolution (USP) |
|
1 |
2.787 |
9464 |
6111 |
0.00000 |
|
2 |
5.142 |
27245 |
9917 |
13.49134 |
|
3 |
7.080 |
24450 |
11532 |
8.24395 |
|
阿莫西林 |
11.223 |
4690129 |
8036 |
10.83894 |
|
4 |
17.268 |
8253 |
11995 |
10.68492 |
|
5 |
25.923 |
13824 |
160765 |
19.46456 |
|
6 |
27.470 |
7857 |
161474 |
5.81389 |
|
7 |
30.797 |
10138 |
315697 |
13.50415 |
|
8 |
31.830 |
15339 |
372563 |
4.83051 |
|
9 |
33.063 |
4103 |
206428 |
4.93651 |
|
10 |
34.923 |
20142 |
359640 |
7.09890 |
|
11 |
37.430 |
3251 |
64676 |
6.10147 |
|
12 |
39.792 |
3050 |
108857 |
4.40964 |
|
梯度假峰 |
41.345 |
8157 |
266135 |
3.86885 |
|
梯度假峰 |
46.210 |
31615 |
205741 |
13.36384 |
|
梯度假峰 |
58.990 |
38043 |
61357 |
18.79275 |
2、阿莫西林对照品
|
Channel A Results |
||||
|
Name |
Retention Time |
Area |
Theoretical plates (USP) |
Resolution (USP) |
|
阿莫西林 |
12.748 |
53226 |
12032 |
0.00000 |
|
梯度假峰 |
41.603 |
6591 |
367607 |
78.05457 |
|
梯度假峰 |
46.417 |
24679 |
245449 |
14.82780 |
|
梯度假峰 |
58.977 |
48226 |
57297 |
18.46654 |
3、梯度空白
|
Channel A Results |
||||
|
Name |
Retention Time |
Area |
Theoretical plates (USP) |
Resolution (USP) |
|
梯度假峰 |
41.513 |
6560 |
352379 |
0.00000 |
|
梯度假峰 |
46.323 |
24802 |
236337 |
14.55634 |
|
梯度假峰 |
58.977 |
42866 |
56800 |
18.45865 |
三、结论
1、第一张图关注8个杂质小峰，第二张图关注12min处的大峰。由第三张图我们可以判断41min，46min，58min处的峰为梯度假峰，因此不予考虑，其次根据药典规定“供试品溶液任何小于对照溶液主峰面积0.05倍（53226*0.05=2613.3）的峰可忽略不计”，实验者已经在积分的时候忽略。
2、根据有关物质的二条规定我们逐条分析：
供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积；
分析：对照品的主峰面积为53226，杂质1-12均小于它，此点合格。
各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰的三倍。
分析：对照品主峰面积的三倍为159678，杂质1-12峰面积和为147116，此点合格。
3、此样品符合10版药典阿莫西林有关物质相关标准。
