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曼氏裂头蚴 IgG 抗体检测试剂盒说明书 

【产品名称】 通用名称：曼氏裂头蚴 IgG 抗体检测试剂盒

英文名称：Spirometra mansoni（S.m）IgG Antibody Test Kit 

【包装规格】48 份/盒、96 份/盒 

【预期用途】本试剂盒采用间接 ELISA 方法定性检测人血清或血浆中的曼氏裂头蚴 IgG 抗体。 

【检测原理】如果待检样品中含有曼氏裂头蚴 IgG 抗体，就会与包被板上的曼氏裂头蚴抗原及 第二步加入的抗人二抗酶标结合物特异性结合。间接结合在包被板上的抗人二抗酶标结合 物与底物反应的显色状况即可反映出样品中是否含有曼氏裂头蚴 IgG 抗体。

【储存条件及有效期】 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为 12 个月。

【适用仪器】 含 450nm 和 630nm 波长的酶标仪；37℃恒温设备；可调单道/多道微量移液器。

【样品要求】 1. 本试剂适用于检测人血清或血浆； 2. 为取得最佳实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品； 3. 短期（3 天内）将进行检测的血清样品可存放于 2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃ 或以下，避免反复冻融。

【检验方法】 1. 洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液（2 号液）按 1：10 稀释（例如，取 100mL 洗涤液 10×，加 900mL 蒸馏水或去离子水混合），充分混匀即为工作浓度洗涤 液。 2. 样品稀释：用样品稀释液（5 号液）将待检血清按 1:100 稀释（如 5μL 血清＋495μL 样品稀释液），充分混匀。 阴性、阳性对照品不用稀释，直接加样。 3. 加样反应：样品孔，每孔仅加入 100μL 待检样品；空白对照 2 孔，每孔仅加入 100μL 样品稀释液；阴性对照 2 孔，每孔仅加入 100μL 阴性对照品；阳性对照 2 孔，每孔仅 加入 100μL 阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光反应 30 分钟。 4. 洗板：甩去孔内液体，每孔注满（若用洗板机每孔加入 250μL）工作浓度洗涤液洗涤 3 次，每次均需停留 1 分钟；最后一次甩净，拍干。 5. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加酶结合物（1 号液）1 滴，盖好封板膜，37℃ 避光反应 30 分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。 6. 显色反应：加底物（3 号液）和显色剂（4 号液）各 1 滴，混匀，盖好封板膜，37℃避 光显色 10 分钟。 7. 终止反应： 加终止液（6 号液）1 滴，以空白对照调零，用酶标仪于 450nm 波长（630nm 作为参比波长）读取 OD 值。 

【参考值】 1. Cut-off 值 (COV)=阴性对照平均 OD 值×2.1 (阴性对照孔 OD 值＜0.07 时，按 0.07 计)。 2. 有效性判定： 阴性对照孔 OD 值≤0.10（若大于 0.10 则实验无效）； 阳性对照孔 OD 值≥0.50（若小于 0.50 则实验无效）。 

【检验结果的解释】 样品 OD 值≥COV，判为曼氏裂头蚴 IgG 抗体阳性； 样品 OD 值＜COV，判为曼氏裂头蚴 IgG 抗体阴性。

【检验方法的局限性】 本试剂盒仅供研究用、不用于临床诊断； 

【注意事项】 1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后，方可开封启用。未使用 完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中，2~8℃密封保存。 2. 加试剂前应将试剂瓶轻摇、混匀。 3. 瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。不同试剂盒的试剂组份不可混用。 4. 孵育时，推荐使用水浴箱。如无水浴箱，可取密封湿盒放入 37℃温箱内使用。 5. 用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。