血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区（图c中间），计数区被分成9个大方格【图c】。中间的大方格为计数室。计数室的划分有两种情况。一种是计数室【图c】（16×25）分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个计数室【图d】（25×16）分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数室都由400个小方格组成。每个计数室边长为1mm，则计数室的面积为l mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm，所以每个计数室的体积为0.1mm3[10-4ml]。
使用血球计数板计数时，先要测定计数室中5个中方格[如图所示]中微生物的数量，再换算成每毫升菌液微生物细胞的数量。
已知：0.1mm3体积=10－4ml
下面【图c】为16（中格）×25（小格）的血球板。
每ml菌悬液中含有细胞数= 计数室5个中格的菌数之和/5 ×16×10000×菌液稀释倍数。
下面【图d】为25（中格）×16（小格）的血球板。
每ml菌悬液中含有细胞数= 计数室5个中格的菌数之和/5 ×25×10000×菌液稀释倍数。