酶联免疫吸附测定（ELISA）概论
酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。ELISA过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上称为包被，加待测抗体（抗原），再加相应酶标记抗体（抗原），生成抗原（抗体）——待测抗体（抗原）——酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收可以计算抗体（抗原）的量，待测抗体（抗原）的定量与有色产生成正比。
酶联免疫吸附测定(ELISA)/酶联免疫斑点(ELISpot)检测服务
酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫斑点技术 (enzyme-linked immunospot assay, ELISpot) 是细胞免疫学研究中敏感的检测方法之一，能够区分活化的T细胞亚群，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞及细胞因子分泌细胞进行检测。在疫苗研究中，ELISpot是一种标准工具，用于通过测量激发强大T细胞反应的能力 (通常是干扰素-γ的分泌) 来确定疫苗的有-效性。为满足客户的检测需求，义翘神州可提供ELISA检测服务和ELISpot检测服务。
ELISA检测服务
优点 | 拥有庞大的产品库：6,000多种优质ELISA应用抗体，500多种ELISA试剂盒。
技术人员长期从事于抗体质控工作，经验丰富，实验结果可靠。
价格优惠，如使用义翘自有产品进行检测，享特殊优惠。 |
周期 | 3-5个工作日 |
服务类型 | 双抗夹心法ELISA检测、间接法ELISA检测、竞争法ELISA检测 |
ELISpot检测服务
优点 | 高灵敏度：百万分之一阳性细胞检测率。
高通量检测 (一块 ELISpot 板可作 96 test）：每天可检测数百个样品。
直观、可信度高。 |
周期 | 2-3个工作日 |
交付内容 | 提供斑点图像、阴阳性检测结果、对比免疫反应强弱及细胞因子分泌量比较等多项结果分析数据 |
ELISA/ELISpot检测技术服务流程
ELISpot检测服务案例
在临床试验和候选疫苗中，细胞毒性T淋巴细胞（CTL）是发挥细胞免疫的一类重要细胞。而 IFN-γ 作为免疫活性细胞分泌的细胞因子在诱导抗病毒免疫中起着重要的免疫调理作用，因此 IFN-γ 的ELISpot是评价抗原特异性T细胞免疫的金标准。
ELISpot检测小鼠T细胞经特异性肽段刺激分泌IFN-γ 的情况
ELISpot检测小鼠T细胞经特异性肽段刺激分泌IL-4 的情况
1. ELISA/ELISpot检测服务常见问题解答
| 方法 | ELISpot | ELISA |
| 原理 | 都是基于抗原抗体反应，ELISpot实际上是双抗夹心法ELISA的延伸和新的发展，可以看做单细胞水平的ELISA。 |
| 样品形式 | 活细胞 | 悬浊液/上清 |
| 测定对象 | 分泌某种细胞因子或抗体的细胞频率 | 样本中的某蛋白含量 |
| 分辨率 | 高 | 无法检测细微的差别 |
| 灵敏度 | ELISpot可精确到检测出几十万甚至百万个淋巴细胞中的一个活化细胞的细胞因子分泌。 | 比ELISpot低百倍 |
| 双重检测 | 能 | 不能 |
| 储存时间 | 数周至数月 | 几个小时 |
| 检测设备及检测方式 | AID ELISpot Reader 通过显色反应，在分泌细胞因子的细胞位置显现清晰斑点，进行计数，从而计算出分泌该细胞因子的细胞频率。 | ELISA Reader 通过显示反应，测吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量 |
2. 为什么选择ELISpot进行检测？
①高灵敏度：百万分之一阳性细胞检测率，比ELISA灵敏度高百倍
②单细胞水平检测
③活细胞功能检测：检测到的细胞因子不是已存在的，而是在检测过程中，被加入的刺激物刺激而分泌出来的
④直观、可信度高：一个阳性细胞一个斑点，斑点数量代表分泌细胞因子的细胞数量多少，斑点大小代表该细胞分泌细胞因子水平的多少
⑤高通量检测(一块ELISpot板可作96test）：每天可检测数百个样品
⑥经过冻存复苏的细胞并不丧失免疫功能
3. ELISpot检测的一般步骤是哪些？适用于哪些细胞的检测？
淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被ELISpot板底PVDF 膜上（预包被的）的特异性单抗捕获。去除细胞后，被捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合，其后再与碱性磷-酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后，PVDF 膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子，通过ELISPot Reader对斑点的进行计数和分析。
理论上讲，所有能分泌细胞因子的细胞都可以用ELISpot进行检测分析。实际应用中常见的检测细胞类型包括：外周血淋巴细胞（PBMC）、骨髓、或者中枢神经系统和淋巴组织的单细胞悬液。
更多免疫检测服务
| 免疫荧光(IF)单染服务 | 免疫组化(IHC)单染服务 | WB及Sally Sue检测服务 | IP/Co-IP技术服务 |
| HE染色及特殊染色服务 | 多重染色服务 | 流式细胞检测服务 | 石蜡组织TMA芯片服务 |
详细信息可查看义翘神州官网https://cn.sinobiological.com/，或者可加微信“sinobio2023”进行联系。