酶联免疫吸附测定（Elisa）概论
酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。
酶联免疫斑点技术 (enzyme-linked immunospot assay, ELISpot) 是细胞免疫学研究中敏感的检测方法之一，能够区分活化的T细胞亚群，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞及细胞因子分泌细胞进行检测。在疫苗研究中，ELISpot是一种标准工具，用于通过测量激发强大T细胞反应的能力 (通常是干扰素-γ的分泌) 来确定疫苗的有-效性。为满足客户的检测需求，义翘神州可提供ELISA检测服务和ELISpot检测服务。
义翘神州提供专业的ELISA实验检测服务，拥有6000多种优质ELISA应用抗体，500种ELISA检测试剂盒。
| ELISA检测服务 | ELISpot检测服务 |
| 特点 | 特点 |
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高通量检测 (一块 ELISpot 板可作 96 test）：每天可检测数百个样品。
直观、可信度高 |
| 周期 | 周期 |
| 3-5个工作日 | 2-3个工作日 |
| 服务类型 | 交付内容 |
| 双抗夹心法ELISA检测、间接法ELISA检测、竞争法ELISA检测 | 提供斑点图像、阴阳性检测结果、对比免疫反应强弱及细胞因子分泌量比较等多项结果分析数据 |
ELISA/ELISpot检测技术服务流程
ELISpot检测服务案例
在临床试验和候选疫苗中，细胞毒性T淋巴细胞（CTL）是发挥细胞免疫的一类重要细胞。而 IFN-γ 作为免疫活性细胞分泌的细胞因子在诱导抗病毒免疫中起着重要的免疫调理作用，因此 IFN-γ 的ELISpot是评价抗原特异性T细胞免疫的金标准。
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ELISpot检测小鼠T细胞经特异性肽段刺激分泌IFN-γ 的情况。 |
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| ELISpot检测小鼠T细胞经特异性肽段刺激分泌IL-4 的情况。 |
ELISA/ELISpot检测相关内容
酶联免疫吸附测定（ELISA）和酶联免疫斑点（ELISpot）检测是两种基于抗原-抗体反应的免疫学实验技术，它们在生物医学研究和诊断中有着广-泛的应用。
ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）：
定义：ELISA是一种定性和半定量或定量检测方法，利用抗原-抗体反应的原理，通过酶标记的抗体来检测特定抗原或抗体的存在和量5758。
试验原理：
抗原或抗体被固定在固相载体（通常是96孔板）上。
加入特异性抗体，这些抗体会与固相载体上的抗原或抗体结合。
清洗去除未结合的抗体。
加入酶标记的二抗体，它与固相上的抗体结合。
再次清洗去除未结合的二抗体。
加入酶的底物，酶催化底物产生可检测的信号（如颜色变化或荧光）。
通过光度计测定吸光度或荧光强度，从而定量分析目标分子的浓度。
Tips：
需要特异性的抗体对。
可进行直接ELISA（抗原固定后直接使用酶标记的抗体检测）或间接ELISA（使用非标记的一抗后，再用酶标记的二抗检测）。
夹心ELISA可以同时使用两种特异性抗体夹住抗原。
竞争ELISA中，样本中的抗原与标记抗原竞争有限的抗体结合位点。
可用于高通量筛选和定量分析。
需要控制实验条件，如孵育时间和温度，以确保结果的准确性。
ELISpot（Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay）：
定义：ELISpot是一种高灵敏度的细胞免疫学检测技术，用于检测单个细胞分泌特定蛋白质（如细胞因子）的能力5051。
试验原理：
使用特异性捕获抗体预先包被固相载体（通常是PVDF膜的孔板）。
将细胞与刺激物一起孵育在包被的孔中，细胞在刺激下分泌特定蛋白质。
分泌的蛋白质被固相上的捕获抗体捕获，形成斑点。
清洗去除未结合的细胞和蛋白质。
加入生物素标记的检测抗体，与捕获的蛋白质结合。
加入链霉亲和素-酶偶联物，与生物素标记的抗体结合。
加入显色底物，酶催化底物产生不溶性色素，形成可见斑点。
斑点的数量和强度与分泌细胞的数量和活性成正比。
Tips：
这两种技术各有特点，ELISA适合于定量分析样本中的蛋白质浓度，而ELISpot更适合于评估细胞免疫反应和检测单个细胞的活性。
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