唾液皮质醇ELISA试剂盒-IBL进口
【产品名称】
通用名称:皮质醇检测试剂盒(唾液,酶联免疫法)
英文名称:Cortisol Saliva ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
唾液皮质醇ELISA试剂盒-IBL进口可用于人唾液中游离可的松的体外定量检测,它可作为库欣综合征和阿狄森氏病诊断的一个辅助工具。
【前言简介】
皮质醇(Cortisol,复合物F)是人体中一种主要的糖皮质激素,它是由肾上腺皮质的束状带产生的。90%的循环可的松会结合到可的松结合球蛋白(CBG,皮质激素传递蛋白)上,7%的循环皮质醇会结合到白蛋白上,其中1-3%是以游离状态存在且才具有活性。游离皮质醇释放到唾液中,并作为一小部分代谢产物从肾脏排出。血液中游离Cortisol的水平可以以负反馈的形式通过下丘脑分泌的CRH(促肾上腺皮质激素释放激素)和垂体分泌的ACTH(促肾上腺皮质激素)来调节Cortisol的分泌,但Cortisol的水平也会受各种因素的影响。个体筛查或动力学实验(如地塞米松抑制实验或ACTH刺激实验)时应多采集几个时段的样品,唾液样品的采集是一个简单的采样方法,不需要方法静脉穿刺取样。孕妇、甲状腺功能低下、肾病综合征、明显肥胖和接受了不同药物治疗(包括口服避孕药)患者的Cortisol水平可能会不正常,所以建议检测其唾液皮质醇。样品采集的前30min内,病人不能饮食、嚼口香糖和刷牙,否则用冷水清洗口腔5min。当病人有口腔疾病、发炎或口腔受到损害(血液污染)时,请勿采样。应当使用适当样品采集器收集唾液样本,并应当采集0.5ml液体。嚼口香糖可以促进口水的分泌。实验开始前,我们建议您将样品冻存于-20℃的环境下。解冻后,将样品于2000--3000×g转速下离心10min以除去颗粒性物质。
皮质醇的检测对评估创伤后应激障碍有重要意义。应激是指机体在在受到各种强烈剌激时所出现的以交感神经兴奋和垂体-肾上腺皮质分泌增多为主的一系列神经内分泌反应以及由此而引起的各种机能和代谢的改变,应激对机体既是有利也是有害的。应激状态下会分泌增多或分泌受抑制的激素主要有儿茶酚胺、促甲状腺皮质激素、糖皮质激素、胰岛素、胰高血糖素等。应激时的神经内分泌反应,是疾病时全身性非特异反应的生理学基础。研究发现:患者血清中皮质醇、5-HT水平显著低于健康人群,且均与患者焦虑和抑郁情绪呈负相关,为临床上PTSD的早期预测、早期诊断提供更多的实验室指标。
【检测原理】
唾液皮质醇ELISA试剂盒-IBL进口实施酶联免疫吸附实验采用的是竞争法的原理。样品中未知量的抗原和一定量的酶标抗原竞争性结合包被在包被孔中的抗体结合位点。温育后洗板以终止竞争反应,加入底物液后,溶液所显示的颜色强度与样品抗原的量成反比。而样品的结果可直接从标准曲线上读取。
唾液皮质醇ELISA试剂盒-IBL进口 实验检测步骤
1) 将标准品、质控品和样品分别50μl加入到相应的微孔中。
2) 在每一微孔中加入100μl酶联物,盖板,轻轻振板。
3) 室温(18-25℃)振荡器上(400-600rpm)温育2小时。
4) 移去封板纸,弃取孔内反应液,每孔用250μl稀释好的洗涤液洗板4次。然后在吸水纸上拍干一除去残余液体。
5) 在每一微孔中加入100μl TMB底物液。
6) 室温(18-25℃)振荡器上(400-600rpm)温育30分钟。
7) 在每一微孔中加入100μl TMB终止液以终止底物反应,轻轻振板,溶液由蓝色变成黄色。
8) 加终止液后15min内450nm处读取OD值(参考波长:600-650nm)
【结果计算】
在半对数坐标纸上或自动计算的方法,以标准品的OD值(Y轴,线性)对其浓度(X轴,对数)做一条标准曲线。使用三次回归、四参数或双对数曲线方程可以得到预想的标准曲线。在推算标准曲线时,应当充分利用好每一个标准品数值(明显逸出的数值应当被忽略,再使用更加合理的数值代替它)。样品的浓度可以从标准曲线上直接读取。检测结果明显提高的唾液样品应当是被血液污染了。
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