人GROα/MGSA检测试剂盒(酶联免疫法)
【前言简介】
GROα/MGSA作为CXC亚家族,在氨基酸序列上与IL-8具有较高的同源性。据报道,它在三维结构分析中也具有相似的结构,与IL-8的白细胞趋化水平几乎相同。由活化的单核细胞、成纤维细胞、上皮细胞和内皮细胞产生已被报道。在幽门螺杆菌胃黏膜感染组中,胃内胃炎和溃疡患者的IL-8和GROα水平显著高于非感染组。GROα被确定为促进黑色素瘤细胞繁殖的因子,是一种具有α、β和 γ3种亚型的多肽。GROα抑制了内皮细胞的繁殖。由于肾癌有大量的肿瘤血管,因此识别血管形成因子非常重要,而GROα在血管形成过程中尤为重要。
【检测原理】
人GROα/MGSA检测试剂盒(酶联免疫法)基于固相夹心法原理,利用两种高特异性抗体进行检测。四甲基联苯胺(TMB)作为一种显色原,显色强度与人GROα/MGSA的量成正比。
【储存】
人GROα/MGSA检测试剂盒(酶联免疫法)应储存于2-8℃中,其效期在试剂盒上注明,不要使用过期试剂。
【检测步骤】
使用前将所有试剂平衡至室温大约30分钟
(1)确定试剂空白孔,加入100μL EIA缓冲液
(2)确定样本空白孔、样本孔和标准品孔
(3)将100μL样本空白(试管8)加入样本空白孔中
(4)将100μL样品和标准品加入相应的孔中
(5)封板,在37℃下孵育1小时
(6)洗涤微孔板4次,每次加入的洗涤缓冲液超过350μL
(7)将100μL标记抗体加入所有孔中,除了试剂空白孔
(8)封板,在37℃下孵育30分钟
(9)洗涤微孔板5次,每次加入的洗涤缓冲液超过350μL
(10)将100μL底物液加入每个微孔中
(11)室温下避光孵育30分钟
(12)将100μL终止液加入每个微孔中
(13)加入终止液后30分钟内测量450nm处的吸光度
【计算结果】
从所有数据中减去样本空白的吸光度,包括样本和标准品
在对数纸上根据标准品吸光度和浓度绘制标准曲线,从标准曲线上读取未知样本的浓度
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