Amplite荧光法锂离子定量试…

定量锂离子在生物化学、医学、环境分析和食品科学等各个科学领域和行业中都具有重要意义，其中锂离子的快速准确测定在电池行业中尤为重要。常用的定量锂离子的方法有多种，包括火焰光度法、离子选择性电极 (ISE)、原子吸收光谱法和荧光分光光度法。火焰光度测定和原子吸收光谱分析需要对样品进行燃烧。它们使用起来很繁琐，并且需要昂贵且复杂的仪器。离子选择性电极需要大量样品并且通常选择性较低。在所有方法中，荧光分光光度法是定量锂离子zui方便的方法。荧光分光光度法涉及将锂离子与特定试剂络合并测量由此产生的荧光变化。然而，由于缺乏强大的荧光锂离子指示剂，商业市场上仍然缺乏基于荧光的锂离子检测试剂盒。 Amplite 荧光法锂离子定量试剂盒使用我们新型强大的锂离子指示剂染料 Lithiumighty 520，它在与锂离子结合后表现出ji大的荧光强度增强。 Lithiumighty ? 520 或许是zui稳定、具有高选择性的锂离子指示剂。与其他商业锂离子检测相比，该试剂盒可用于快速测定各种样品中的锂浓度。这种基于微孔板的检测试剂盒需要极少量的样品。它特别适合微量形式的锂离子浓度测定。百萤生物是AAT Bioquest的zhong国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法锂离子定量试剂盒。 

样品实验方案

简要概述

1.添加 50 μL NaCl 标准品或测试样品
2.添加 50 μL Lithiumighty 520 工作溶液。
3.在室温孵育 5-10 分钟
4.检测 Ex/Em=490/525 nm 处的荧光

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1制备 Lithiumighty? 520 储备溶液
将 100 μL DMSO（组分 D）添加到 SoNa 520 小瓶（组分 A）中。

注意：制作一份未使用的 Lithiumighty? 520 储备溶液等份并储存在 ≤ -20 oC 下。避光并避免重复冻融循环。

2.标准溶液配制

氯化钠标准品配制
将 350 μL 蒸馏水添加到 NaCl 标准样品瓶（组分 C）中，接下来，使用测定缓冲液（组分 B）稀释该 1M 储备溶液以制备 300 mM (LS1)。然后进行 1:2 连续稀释以获得连续稀释的锂标准品 (LS2 – LS7)。

3.工作溶液配制

准备 Lithiumighty 520 工作溶液

将 100 μL Lithiumighty? 520（组分 A）添加到 5 mL 测定缓冲液（组分 B）中。用箔纸覆盖工作溶液或将其置于黑暗中，以保护工作溶液免受光照。

注意：为了获得zui佳效果，该溶液应在制备后几小时内使用。

注意：5 mL 工作溶液足以进行 100 次测试。

操作步骤

表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中锂标准品和测试样品的布局。

LS=锂标准品（LS1 - LS7，300 至 4.69 mM，2X 稀释）； BL=空白对照； TS=测试样品

表2.每个孔的试剂组成。

1.根据表 1 和 2 中提供的布局制备锂标准品 (LS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板，每孔使用 25 μL 试剂，而不是 50 μL。

2.向锂标准品、空白对照和测试样品的每个孔中添加 50 μL Lithiumighty? 520 工作溶液，使测定体积为 100 μL/孔。对于 384 孔板，请在每个孔中添加 25 μL，总体积为 50 μL/孔。

3.将反应物在室温下避光孵育 5 至 10 分钟。

4.使用荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm（cutoff=515nm）处检测荧光增加。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 

图1.使用 Amplite 荧光法锂离子试剂盒在 96 孔黑色实心板中测量锂剂量反应。

参考文献