一套线性校准荧光微粒(FITC)BW036001~BW036006为线性校准荧光微球标准物质,主要用于流式细胞仪FITC通道的线性校准、光路校直,灵敏性、稳定性检测,实验室质量控制,评价和检验分析方法,考核人员操作水平。
一、样品制备
本标准物质采用分散聚合制备3.0~3.4μm的单分散聚苯乙烯空白微球,将荧光染料包覆于空白微球内得到5种荧光微球。将其均匀分散于加有少量稳定剂的纯水中配制成悬浮液,在洁净条件下进行分装。本标准物质共6瓶(含1瓶空白微球),每瓶≥1mL,参考浓度为1×107/mL。
二、溯源性及定值方法
一套线性校准荧光微粒(FITC)BW036001~BW036006的粒径采用扫描电子显微镜结合图像分析法进行定值,定值结果可溯源至长度基准。荧光强度的定值采用荧光分光光度计,并采用流式细胞仪BD FACSAriaTM Ⅱ进行验证。
三、特性量值及不确定度
本标准物质粒径定值结果:
编号 | 数量中值粒径 | 数量均值粒径 | 不确定度,k=2 | 变异系数 |
BW036001-036006 | 3.2μm | 3.3μm | 4% | 3.7% |
荧光强度定值结果:
编号 | MESF[a] |
BW036002 | 4600 ± 200 |
BW036003 | 14200 ± 600 |
BW036004 | 44500 ± 1900 |
BW036005 | 144000 ± 5800 |
BW036006 | 321000 ± 12700 |
[a] 等量可溶性荧光分子。
四、均匀性检验及稳定性考察
根据《一级标准物质》技术规范,对一套线性校准荧光微粒(FITC)BW036001~BW036006样品随机抽样进行均匀性和稳定性检验,结果表明标准物质的均匀性、稳定性良好。该标准物质自定值日期起,效期为1年。
五、包装、储存及使用
本标准物质采用避光塑料瓶包装,冷藏、避光保存,运输时应有冷藏和防碎裂保护。使用前要将样品充分分散均匀,滴加至PBS缓冲液中,混匀后使用。
六、 安全警示
本标准物质中含少量防腐剂,切勿入口。