易错 RCA(Error-Prone Rolling Circle Amplification)是利用phi29DNA多聚酶在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、不同的Mg 浓度和MnCl2存在时)能够按较高的机率引入随机引入突变。易错 RCA 弥补了易错PCR的巨大缺陷,其中一个缺陷是 Taq DNA 聚合酶的连续合成能力低,故易错PCR 的模板一般不能超过1kb。而 phi29 DNA 聚合酶可联系合成长达 70kb 的 DNA,故易错RCA可以直接使用几乎任何长度的质粒为模板。并且扩增后还可以直接进行转化,免去纯化和克隆的麻烦。
环状 DNA 模板易错 RCA 试剂盒221006-50环状 DNA 模板易错 RCA 试剂盒221006-50环状 DNA 模板易错 RCA 试剂盒221006-50
本公司基于上述原理,精心开发了本产品,它具有下列特点:
即开即用,十分简单方便,用户不需要辛苦摸索条件。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,一般能产生 3-5 个突变/kb。如果需要高的突变率,只需把上一次易错 RCA 的产物用作下一次易错RCA的模板即可。
3. 靶分子 DNA 可以是各种长度的质粒,甚至全基因组。
4. 易错 RCA 的扩增产品可以直接转化,免去后续纯化和克隆等操作。
5. 易错 RCA 的产物简单稀释后,还可以通过全基因组扩增制备更多DNA(本产品不含相关试剂)。
6. RCA 属于恒温扩增,只需要水浴或金属浴,不需要贵重的PCR仪器。
7. 本产品足够 50 次 20uL 系的易错 RCA 反应。
8. 本产品只能用于科研。