产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Animal Tissue PCR Component 动物组织PCR组分 | 10170ES50 | 50 T | 125.00 |
Animal Tissue PCR Component 动物组织PCR组分 | 10170ES70 | 200 T | 435.00 |
产品描述
本试剂盒中的2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液，含有热启动Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化了实验的操作步骤，可以高通量操作并提高实验结果的重现性。本试剂盒中的PCR Enhancer是一种由多种成分组成的混合添加剂，在PCR反应中，PCR Enhancer能够有效降低高GC模板和具有复杂二级结构模板的解链温度，极大地减少DNA二级结构对PCR的影响，增加PCR反应的灵敏度和特异性，且兼容几乎所有DNA聚合酶的扩增。本试剂盒主要应用于动物基因型鉴定，建议搭配动物组织裂解组分（Cat NO.19698ES）一起使用，效果更佳。
产品组分
编号 | 组分 | 产品编号/规格 |
10170ES50（50 T） | 10170ES70（200 T） |
10170-A | 2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) | 500 μL | 2 ×1 mL
|
10170-B | 5 × PCR Enhancer | 200 μL | 800 μL |
b）2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) 包含 PCR 扩增所需要的热启动 Taq DNA 聚合酶、dNTP 和 Mg2+等；已混有溴酚蓝染料作为电泳指示剂， PCR 产物可以直接进行电泳。
c）5 × PCR Enhancer ：高GC含量扩增（如大于65%）时，建议使用5 × PCR Enhancer。
运输与保存
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
PCR反应tix
组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
2× Tissue Direct PCR Mix（With Dye） | 10 | 1 × |
Forward Primer（10 μM） | 0.5 | 0.25 μM |
Reverse Primer（10 μM） | 0.5 | 0.25 μM |
裂解产物（DNA模板） | 2 | - |
无菌超纯水 | To 20 | - |
【注】：各组分使用前应充分混匀。
a）模板使用量：建议总tix的5-20%之间，避免超过总tix的20%。
b）引物终浓度：反应性能较差时，推荐在 0.1- 0.5 μM 范围内调整引物浓度。
c）反应tix：推荐使用 20 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
d）tix配制：配制好PCR反应tix，置于涡旋仪上涡旋混匀，瞬时离心将反应液集于管底。
e）对照反应：建议进行PCR时，设置阳性和阴性PCR对照反应以便于排除假阳性或假阴性的干扰。
PCR反应条件
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 35 |
退火* | 60℃ | 20 sec |
延伸 | 72℃ | 20 sec |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*退火温度：请参考引物的理论 Tm 值，退火温度可设置低于引物理论值5℃，或通过梯度 PCR 确定温度。
注意事项：
1. 建议使用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响 PCR 效率。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。
3. 本产品仅作科研用途！
HB210811