MolPure? Marine Animals DNA Kit 海洋动物DNA提取试剂盒
产品信息
产品名称 | 产品货号 | 规格 | 价格（元） |
MolPure? Marine Animals DNA Kit 海洋动物DNA提取试剂盒 | 18725ES50 | 50 T | 412.00 |
MolPure? Marine Animals DNA Kit 海洋动物DNA提取试剂盒 | 18725ES70 | 200 T | 1482.00 |
产品描述
MolPure? Marine Animals DNA Kit适用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物基因组DNA的提MolPure? Marine Animals DNA Kit适用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物基因组DNA的提取。取。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的缓冲液配方可最大限度将细胞代谢物、蛋白等杂质去除。提取的DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如酶切、PCR、文库构建等。
试剂盒组分
类别 | 编号 | 组分名称 | 18725ES50 (50 T) | 18725ES70 (200 T) |
Part I | 18725-A | Proteinase K | 500 μL | 1 mL×2 |
Part II | 18725-B | MolPure? DNA Column M2 | 50个 | 200个 |
18725-C | 2 mL Collection Tube M2 | 50个 | 200个 |
18725-D | AC Buffer M2 | 15 mL | 60 mL |
18725-E | LB Buffer M2 | 25 mL | 100 mL |
18725-F | BD Buffer M2 | 20 mL | 80 mL |
18725-G | PL Buffer M2 | 20 mL | 80 mL |
18725-H | Wash Buffer* | 12 mL | 48 mL |
18725-I | Elution Buffer | 10 mL | 40 mL |
运输与保存方法
Part I组分冰袋运输，室温或4℃可保存3个月，-20℃保存2年。
Part II组分常温运输，常温保存，有效期18个月。
注意事项
1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. LB Buffer M2低温时可能析出，可37℃温浴复溶至溶液澄清，不影响使用效果。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
实验前准备
1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，100%乙醇，液氮（组织研磨用），1.5 mL离心管等。
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到12,000 rpm转速的传统台式离心机。
3. 首次使用前，须在Wash Buffer*（18725-H）瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。如果发现Wash Buffer*由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持Wash Buffer*中的乙醇含量。
操作方法
一、样本预处理：
1. 切取不多于30 mg（米粒大小）的动物组织材料，在液氮中将组织研磨成粉末，并转移至1.5 mL的离心管中。
注：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20 mg。
2. 加入400 μL LB Buffer M2和10 μL的Proteinase K。
注：不可将Proteinase K直接加入到LB Buffer M2，避免Proteinase K失活。
注：离心管中若有组织凝结块，可以用枪头吸打散匀。
3. 涡旋振荡混匀，瞬离收集管壁液体。
4. 置于55℃ 温浴20 min-3 h，每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15 秒，直至样品澄清透明。
注：不同组织完全裂解的时间可能会差异较大。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。
5.（选做）若残留RNA对后续实验有影响，可加入5 μL RNase A (100 mg/mL)（自备，产品货号：10406ES）溶液，振荡混匀，室温放置5-10 min。
6. 取出离心管降至室温，然后轻轻震荡混匀。
7. 依次加入300 μL PL Buffer M2和300 μL BD Buffer M2，用力摇匀。
注：如果样品量较少或溶液澄清不粘稠，可不添加PL Buffer M2，只添加BD Buffer M2摇匀即可。
8. 12,000 rpm离心5 min。溶液分层，上层为蓝色的抽提层，下层为透明水相，两层溶液中间可能会有部分沉淀层，DNA在下层水相中。
9. 小心吸取下层溶液，用于后续上柱纯化。
注：避免吸到上层溶液及中间层的沉淀。
二、DNA提取：
1. 将MolPure? DNA Column M2套入2 mL Collection Tube M2中，备用。
2. 加入200 μL AC Buffer M2至MolPure? DNA Column M2中，12,000 rpm离心1 min，弃掉废液。
3. 将上述样本预处理液加入MolPure? DNA Column M2中，12,000 rpm离心1 min，弃掉废液。
4. 将MolPure? DNA Column M2放回收集管中，加入500 μL Wash Buffer*，12,000 rpm离心30 sec，弃废液。
注：确保Wash Buffer*已添加无水乙醇。
5. 重复一遍步骤4。
6. 将MolPure? DNA Column M2放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，以除去残留的Wash Buffer*。
7. 将MolPure? DNA Column M2放入新的1.5 mL离心管中，在MolPure? DNA Column M2中央加入50-100 μL Elution Buffer，室温放置5 min。然后12,000 rpm离心1 min。收集滤液，即为DNA溶液。
注：可通过以下方式提高回收产量：①65℃预热Elution Buffer；②将DNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。
8. DNA溶液可置于-20℃长期保存。
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