DNA退火缓冲液(5X)
货号:AA0250
规格:1mL/5mL
保存:-20℃,有效期至少 12 个月。
产品简介:AA0250-1mL DNA退火缓冲液(5X) 金克隆
DNA 退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos),即 DNA 寡核苷酸退火缓冲液,该退火缓冲液 不仅可以用于常规的DNA Oligo的退火,而且特别适合于较难退火的用于siRNA质粒构建的DNA Oligo 的退火。使用 DNA 退火缓冲液(5×)可以有效避免 DNA Oligo 自身形成发夹结构,并且两条 Oligo 退火后可以直接和经酶切纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。 使用本试剂操作非常简单,只需把待退火的 DNA Oligo 和 DNA 退火缓冲液(5×)按照一定比 例混合后,置于 PCR 仪上,约 60 分钟即可完成。
操作步骤(仅供参考):AA0250-1mL DNA退火缓冲液(5X) 金克隆
1. 用去离子水将 DNA 退火缓冲液(5×)稀释成 1×工作浓度。
2. 用 DNA 退火缓冲液(1×)分别溶解互补的两条 DNA 寡核苷酸单链,使它们的摩尔浓度相等;
3. 取相同体积的步骤 2 中得到的寡核苷酸单链溶液混合,置于 PCR 反应管中,样品不要用矿物 油覆盖。
4. 将 PCR 反应管置于 PCR 仪中,设置反应条件: 95℃变性 2min;缓慢降温至 25℃,降温过 程用时至少 45min;产物可 4℃短暂保存,用于后续实验。长期保存可于-20℃冻存。
注意事项:AA0250-1mL DNA退火缓冲液(5X) 金克隆
1. DNA 退火缓冲液(5X) 只适合于 DNA oligo 的退火,不能用于 RNA oligo 的退火。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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