产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
TOP10 Chemically Competent Cell | 11801ES80 | 10×100 μL | 166.00 |
TOP10 Chemically Competent Cell | 11801ES92 | 100×100 μL | 1236.00 |
产品描述
本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg DNA以上，广泛适用于的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。可用于构建克隆，蓝白斑筛选等，具有链霉素(StrR )抗性。
TOP10感受态细胞基因型：F-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15 △lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (StrR ) endA1 nupG
产品组分
编号 | 组分 | 产品编号/规格 |
11801ES80 | 11801ES92 |
11801-A | TOP10 感受态细胞 | 100 μL×10 | 100 μL×100 |
11801-B | pUC19 (control vector, 10 pg/μL) | 10 μL | 10 μL |
运输与保存方法
干冰运输；-80℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
注意事项
1) 本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。
2) 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率。
3) 混入质粒时应轻柔操作。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5) 本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 取100 μL感受态细胞，冰浴、解冻（大约5 min）。
2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置25 min。
【注】：所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
3. 42℃水浴中热激45 sec，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。
【注】：此过程不要晃动，否则会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。
5. 5000 rpm离心1 min收集菌体，留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上，37℃培养过夜。如进行蓝白斑筛选操作，请将平板放37℃培养至少13 h。
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