蛋白-抗体(抗原亲和纯化)
服务编号:YKSP-1003
服务标准:
1.ELISA≥1:80000:
2.抗体(抗原亲和纯化):3-5 mg
蛋白-抗体(抗原亲和纯化)
服务内容:
1. 抗原质检
2. 2只兔子,采集免疫前血清,进行4次免疫
3. 血清小样采集和检测
4. 抗血清效价符合标准,采全血,分离抗血清
5. 抗原偶联到亲和树脂,制备抗原亲和柱
6. 抗血清抗原亲和纯化,获得特异性抗体
蛋白-抗体(抗原亲和纯化)
最终交付的材料:
1.免疫前血清0.5 ml
2.抗体 3-5mg;
3.Elisa数据报告,完整项目报告
样品要求:
1. 如果提供蛋白:8 mg蛋白(3 mg用于免疫,5 mg用于纯化),浓度>0.4 mg/ml,且缓冲液中不含有机溶剂,不要用Tris或其它含氨基的缓冲液
2.如果多肽偶联物,须另提供3 mg多肽,纯度>85%
注:抗血清经抗原亲和纯化可获得血清中针对抗原的特异性IgG,去除血清中许多无关的蛋白成分和抗体,能很好地降低实验的背景干扰
抗体的结构域
Ig分子的两条重链和两条轻链都可折叠成数个球形结构域(domain),每个结构域行使其相应的功能。轻链有VL和CL两个结构域;IgG、IgA和IgD的重链有VH、CH1、CH2和CH3四个结构域;IgM和IgE的重链有五个结构域,即多一个CH4结构域。每个结构域由约110个氨基酸组成,氨基酸序列具有相似性,其二级结构是由几条多肽链折叠形成的两个反向平行的β片层(anti—parallel β sheet)构成的,两个β片层中心的两个半胱氨酸残基由一个链内二硫键垂直连接,形成一个“β桶状(βbarrel)”或“β-三明治 (β sandwich)”结构,这种折式称为免疫球蛋白折叠(immunoglobulin folding)。许多膜型和分泌型的蛋白质分子也含有这类独特折叠的二级结构,因此,这类分子被统称为免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)