PN1200 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
货号:PN1200
规格:25T/50T
产品组成:
| 25T | 50T | 保存条件 |
30%Acr/Bis(29:1) | 100mL | 100mL×2 | 4℃,避光 |
1.5mol/L Tris(pH8.8) | 100mL | 100mL×2 | 常温 |
1.0mol/L Tris(pH6.8) | 30mL | 60mL | 常温 |
PAGE胶凝固剂 | 1g | 2g | 干粉4℃;溶液-20℃ |
10%SDS | 5mL | 10mL | 常温 |
PAGE胶促凝剂 | 0.8mL | 1.5mL | 4℃,避光 |
*使用前按每克PAGE胶凝固剂加蒸馏水10mL配置成10%溶液,并分装成小体积后冻存于-20℃。
*检测SDS溶液是否澄清,若出现絮状物或沉淀可放37℃片刻至溶解,不影响效果。
产品说明:
PN1200 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒包括SDS-PAGE凝胶制备所需的全套试剂,客户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶) ,方便、快捷、实惠。本试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。PN1200 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒约可配制25/50块常规大小的PAGE胶。
操作步骤(仅供参考):
PN1200 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶浓度,最佳凝胶浓度见附表1。
一、灌制分离胶(各试剂使用量见附表3)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr/Bis(29:1)、1.5mol/L Tris(pH8.8)、10%SDS和双蒸水在烧杯或试管中混合。
3、加入10%PAGE胶凝固剂和PAGE胶促凝剂,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。)
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶(各试剂使用量见附表2)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、1.0mol/L Tris(pH6.8)、10%SDS和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%PAGE胶凝固剂和PAGE胶促凝剂,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
SDS- PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) |
纯水 | 30%Acr/Bis(29:1) | 1.0mol/L Tris(pH6.8) | 10%SDS | 10%PAGE胶凝固剂 | PAGE胶促凝剂 |
5ml | 3.42mL | 0.83mL | 0.625mL | 50μL | 75μL | 7.5μL |
附表3. 配制SDS-PAGE分离胶
凝胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) |
纯水 | 30%Acr/Bis (29:1) | 1.5mol/L Tris(pH8.8) | 10%SDS | 10%PAGE胶凝固剂 | PAGE胶促凝剂 |
6% | 10ml | 5.3 mL | 2 mL | 2.5mL | 100μL | 100μL | 10μL |
8% | 10ml | 4.6 mL | 2.7 mL | 2.5mL | 100μL | 100μL | 10μL |
10% | 10ml | 4.0 mL | 3.3 mL | 2.5mL | 100μL | 100μL | 10μL |
12% | 10ml | 3.3mL | 4 mL | 2.5mL | 100μL | 100μL | 10μL |
15% | 10ml | 2.3mL | 5mL | 2.5mL | 100μL | 100μL | 10μL |
注意事项:
1、10%PAGE胶凝固剂配制后分装-20℃保存。10%PAGE胶凝固剂溶液不稳定,应尽量减少室温存放时间,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;10%PAGE胶凝固剂溶液在4℃有效期为一周。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20℃保存的PAGE胶凝固剂溶液。
2、10%SDS在低温情况下容易析出,配置之前请确保10%SDS溶液澄清透明。若有析出,可37℃水浴溶解后使用。
3、PAGE胶促凝剂易挥发,使用后请盖紧瓶盖。
4、PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及PAGE胶凝固剂、PAGE胶促凝剂的用量密切相关;在其它条件不变的情况下,可通过改变PAGE胶凝固剂及PAGE胶促凝剂的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作;附表中的PAGE胶凝固剂、PAGE胶促凝剂的用量可供参考,应根据实际操作情况做适当的调整。
5、在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
6、在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
PN5100-2L | 0.01M PBS(干粉) PH7.2-7.4 | 2L |
CS9603 | 中性树胶 | 20mL/100mL |
PN5120 | 20×PBS缓冲液(0.01M *20,pH7.2-7.4) | 500ml/500ml*10 |
PN2265 | 5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 | 500ml |
PN2270 | 10x Tris-mops 缓冲液 | 100ml/500ml |
PN2510 | 考马斯亮蓝快速染色液 | 500ml |
PN2512 | 考马斯亮蓝标准染色液 考马斯亮蓝染色套装(染色液+脱色液) | 100+500ml |
PN2251 | 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) | 10ml |
PN2252 | 5×蛋白上样缓冲液(含β-巯基还原剂) | 10ml |
AA0118 | 10%PAGE胶凝固剂APS | 5×1ml /5m l/10ml/100mL |
PN1068 | 1M Tris-HCL缓冲液(pH6.8) | 100ml |
PN1200 | SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 | 25T/50T |
PN1329 | 30% Acr-Bis(29:1) 蛋白制胶液 30%丙烯酰胺(29:1) | 100ml/500ml |
PN1403 | Acr-Bis(49.5%T,3%C) | 100ml/500ml |
PN1406 | Acr-Bis(49.5%T,6%C) | 100ml/500ml |
PN1437 | 40% Acr-Bis(37.5:1) | 100ml/500ml |
PN1588 | 1.5M Tris-HCL缓冲液(pH8.8) | 100ml/500ml |
PN5911 | 10%SDS溶液 | 100ml/500ml |
T8090 | TEMED 四甲基乙二胺 PAGE 胶促凝剂 | 10ml/100ml |
PN0110 | Bradford法蛋白浓度测定试剂盒 2500微孔 | 2500微孔 |
PN0111 | 5×G250(蛋白定量专用) | 100ml/500ml |
PN0120 | BCA法蛋白浓度测定试剂盒 500微孔 | 500微孔 |
PN0130 | Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 1000微孔 | 1000微孔 |
PN0260-B | Folin-Phenol 福林酚 | 50ml/100ml/500ml |
PN0260-S | Folin-Phenol 福林酚 sigma | 50ml/100ml/1L |
PN3130 | BCIP/NBT显色试剂盒 | 25ml/125ml |
PN5111 | 10×PBST | 500ml |
PN3211 | TMB单组分显色液 | 100ml/500ml |
PN4610 | ELISA包被液(10x) | 100ml/500ml |
PN4620 | ELISA终止液 | 100ml/500ml |
PN2410 | 10×电泳转移缓冲液,电转液 | 500ml |
PN3120 | DAB显色试剂盒(20×) 2*10 | 3ml/10ml |
PN3122 | 增强型DAB显色试剂盒(20×)3*10 | 3ml/10ml |
PN3300 | ECL超敏发光液 ECL Plus荧光检测试剂 | 12.5ml*2/50ml*2 |
PN5211 | 10×TBST | 500ml |
PN5220 | 20×TBS缓冲液 | 500ml |
PN5212 | 20×TBST | 500ml |
PN5360 | 0.01M柠檬酸钠缓冲液 pH6.0,干粉 | 1L/2L |
PN4510 | EDTA脱钙液(PH7.2) | 100ml/500ml |
PN4310 | 抗荧光衰减封片剂 | 5ml/25ml/100ml/500ml |
PN4311 | 抗荧光衰减封片剂(含DAPI) | 5ml/25ml |
PN4204 | 4% PFA固定液 4%组织细胞固定液 | 100ml/500ml |
PN4208 | 8% PFA固定液 | 100ml/500ml |
PN4115 | 柠檬酸钠抗原修复液(50×) | 100ml/500ml |
PN4125 | EDTA抗原修复液(50×) | 100ml/500ml |
EX6010 | 高效RIPA裂解液 /细胞快速裂解液 | 20ml/100ml |
EX6020 | RIPA裂解液 | 100ml |
EX6030 | 非变性裂解液 | 100ml |
PN4710 | 膜封闭液 | 100ml/500ml |
PN4720 | 膜再生液 | 100ml/500ml |
MY0034 | 封闭用兔血清(原液) | 10ml |
MY0035 | 封闭用鸡血清(原液) | 10ml |
MY0038 | 封闭用山羊血清(原液) | 10ml |
MY0039 | 封闭用绵羊血清(原液) | 10ml |
MY0042 | 封闭用马血清(原液) | 10ml |
MY0050 | 封闭用驴血清(原液) | 10ml |
PN4810 | 5%BSA封闭液 | 10ml/100ml/500ml |
PN4400 | 10×多聚赖氨酸(15-30w) | 10ml |
PN1601 | 剥离硅烷 | 200ml |
PN1602 | 亲和硅烷 | 25ml |
PR1950 | 彩虹130广谱蛋白Marker(15-130KD) | 250ul(50T) |
PN4910 | 固定液(2%/2.5%) | 100ml/500ml |
MP1003 | 超低分子量蛋白Marker(3.3-20. 1kD) | 15T |
MP1014 | 低分子量蛋白Marker(14.4-97.4kD) | 20T |
MP1043 | 次高分子量蛋白Marker(43-200kD) | 10T |
MP4004 | Western blotting蛋白Marker | 10T(50ul)/20T(100ul) |
MP3181 | 预染彩虹Marker I(11-180KD) | 250ul(50T)/2*250ul(100T) |
MP3241 | 预染彩虹Marker II(11-245KD) | 250ul(50T)/2*250ul(100T) |
MP3245 | 预染彩虹Marker III(5-245KD) | 250ul(50T)/2*250ul(100T) |
MP2003 | 预染超低分子量蛋白Marker(3.3-31kD) | 20T |
MP2014 | 预染低分子量蛋白Marker(14.4-97.4kD) | 20T |
MP2043 | 预染次高分子量蛋白Marker(43-200kD) | 10T |
PN2261 | 2×蛋白上样缓冲液(含DTT) | 10ml |
PN2262 | 2×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂) | 10ml |
PN2271 | 4×蛋白上样缓冲液(含DTT) | 10ml |
PN2272 | 4×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂) | 10ml |
PN2281 | 4×非变性蛋白上样缓冲液 | 10ml |
PN0011 | BSA蛋白定量标准品(5mg/ml) | 1ml |
EX6001 | PMSF溶液(100mM) | 1.5ml/10ml/100ml |
PN2011 | 1M DTT溶液 | 1ml/5ml |
PN2520 | 10×丽春红 | 10ml |
PN5370 | 柠檬酸钠缓冲液0.1mol/L, pH4.5,无菌溶液 | 100ml/500ml |
PN1800 | 抗体稀释液(普通型) | 10ml/50ml/100ml |
EZ9010 | 0.1%胰蛋白酶液消化液 | 10ml |
PN4120 | EDTA抗原修复液(1×) | 100ml/500ml |
PN4131 | 冰冻切片抗原修复液(1×) | 100ml/500ml |
PN4141 | 细胞爬片抗原修复液(1×) | 100ml/500ml |
EX6110 | 蛋白提取试剂盒(强) 全蛋白提取试剂盒(强) | 50T/100T |
EX6120 | 蛋白提取试剂盒(中) 全蛋白提取试剂盒(中) | 50T/100T |
EX6130 | 植物蛋白提取试剂盒 | 50T/100T |
EX6140 | 磷酸化蛋白提取试剂盒 | 50T/100T |
EX6150 | 胞浆蛋白提取试剂盒 | 50T/100T |
EX6160 | 核蛋白抽提试剂盒 | 50T/100T |
EZ8010 | (All-in-one,100x)蛋白磷酸酶抑制剂混合物 | 1ml |
MG0015 | 人血清IgM(液体)70-80%纯度 | 10mg |
MG0016 | 人血清IgA(液体)70-80%纯度 | 10mg |
MG0031 | 小鼠IgG(干粉) | 10mg |
MG0032 | 大鼠IgG(干粉) | 10mg |
MG0001 | 人IgG干粉 | 10mg |
MC0101 | 羊抗人IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0131 | 羊抗小鼠IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0132 | 羊抗大鼠IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0133 | 羊抗牛IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0134 | 羊抗兔IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0137 | 羊抗猪IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0163 | 羊抗BSA(纯化抗体) | 1mg |
MC0201 | 兔抗人IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0231 | 兔抗小鼠IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0232 | 兔抗大鼠IgG(纯化抗体) | 1mg |
MC0261 | 兔抗-HRP(纯化抗体) | 1mg |
MC0264 | 兔抗生物素(纯化抗体) | 1mg |
MC0265 | 兔抗亲和素(纯化抗体) | 1mg |
MC0268 | 兔抗骆驼IgG(纯化抗体) | 1mg |
MS0101 | 羊抗人IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0110 | 羊抗人血清(免疫血清) | 0.5ml |
MS0131 | 羊抗小鼠IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0132 | 羊抗大鼠(免疫血清) | 0.5ml |
MS0133 | 羊抗牛IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0134 | 羊抗兔IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0135 | 羊抗鸡IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0137 | 羊抗猪IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0142 | 羊抗马IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0163 | 羊抗BSA(免疫血清) | 0.5ml |
MS0201 | 兔抗人IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0231 | 兔抗小鼠IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0232 | 兔抗大鼠IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MS0235 | 兔抗鸡IgG(免疫血清) | 0.5ml |
MF0001 | 人IgG-FITC | 0.5ml |
MF0007 | 人白蛋白-FITC | 0.5ml |
MF0063 | BSA-FITC | 0.5ml |
MF0065 | Avidin-FITC | 0.5ml |
MF0068 | FITC标记链霉亲和素 | 0.1ml |
MF0069 | OVA-FITC | 0.5ml |
MF0101 | 羊抗人IgG-FITC | 0.3ml |
MF0102 | 兔抗人IgA-FITC | 0.5ml |
MF0103 | 兔抗人IgM-FITC | 0.5ml |
MF0107 | 羊抗人白蛋白-FITC | 0.5ml |
MF0108 | 羊抗人纤维蛋白原-FITC | 0.5ml |
MF0109 | 羊抗人C3-FITC | 0.5ml |
MF0131 | 羊抗小鼠IgG-FITC | 0.3ml |
MF0132 | 羊抗大鼠IgG-FITC | 0.3ml |
MF0238 | 兔抗山羊IgG-FITC | 0.3ml |
MF0240 | 兔抗豚鼠IgG-FITC | 0.3ml |
MF0241 | 兔抗猴IgG-FITC | 0.5ml |
MF0264 | 兔抗生物素-FITC | 0.5ml |
MF0265 | 兔抗Avidin -FITC | 0.5ml |
MH0007 | 人白蛋白-HRP | 0.1ml |
MH0008 | 人纤维蛋白原-HRP | 0.1ml |
MH0063 | 牛血清白蛋白 BSA-HRP | 0.1ml |
MH0064 | HRP标记生物素 | 0.1ml |
MH0065 | HRP标记亲和素 | 0.1ml |
MH0068 | HRP标记链霉亲和素 | 0.1ml |
MH0101 | 羊抗人IgG-HRP | 0.1ml |
MH0131 | 羊抗小鼠IgG-HRP | 0.1ml |
MH0132 | 羊抗大鼠IgG-HRP | 0.1ml |
MH0134 | 羊抗兔IgG-HRP | 0.1ml |
MH0135 | 羊抗鸡IgG-HRP | 0.1ml |
MH0238 | 兔抗山羊IgG-HRP | 0.1ml |
MH0261 | 兔抗HRP-HRP | 0.1ml |
MH0262 | 兔抗FITC-HRP | 0.1ml |
MH0264 | 兔抗生物素-HRP | 0.1ml |
MH0265 | 兔抗亲和素-HRP | 0.1ml |
MH0266 | 兔抗Dig-HRP | 0.1ml |
MH0268 | 兔抗骆驼IgG-HRP | 0.1ml |
MR0101 | 羊抗人IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0107 | 羊抗人白蛋白-RBITC | 0.5ml |
MR0108 | 羊抗人纤维蛋白原-RBITC | 0.5ml |
MR0109 | 羊抗人C3-RBITC | 0.5ml |
MR0131 | 羊抗小鼠IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0132 | 羊抗大鼠IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0133 | 羊抗牛IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0134 | 羊抗兔IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0135 | 羊抗鸡IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0137 | 羊抗猪IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0142 | 羊抗马IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0202 | 兔抗人IgA-RBITC | 0.5ml |
MR0203 | 兔抗人IgM-RBITC | 0.5ml |
MR0236 | 兔抗狗IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0238 | 兔抗山羊IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0240 | 兔抗豚鼠IgG-RBITC | 0.5ml |
MR0241 | 兔抗猴IgG-RBITC | 0.5ml |
MB0001 | 生物素化人IgG | 0.1ml |
MB0101 | 生物素化羊抗人IgG | 0.1ml |
MB0131 | 生物素化羊抗小鼠IgG | 0.1ml |
MB0132 | 生物素化羊抗大鼠IgG | 0.1ml |
MB0134 | 生物素化羊抗兔IgG | 0.1ml |
MB0263 | 生物素化BSA | 0.1ml |
MK1011 | SABC(小鼠IgG)-POD kit | 一盒 |
MK1012 | SABC(小鼠IgG)-AP kit | 一盒 |
MK1013 | SABC(小鼠IgG)-FITC kit | 一盒 |
MK1015 | SABC(小鼠IgG)- FITC(POD) kit | 一盒 |
MK1021 | SABC(兔IgG)-POD kit | 一盒 |
MK1022 | SABC(兔IgG)-AP kit | 一盒 |