Hieff ? Smearase
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Hieff ? Smearase | 12907ES08 | 8 T | 563.00 |
12907ES24 | 24 T | 1263.00 |
12907ES96 | 96 T | 4663.00 |
产品描述
Hieff ? Smearase是针对高通量测序平台设计的新一代酶切试剂。本品采用高质量的片段化酶，酶切效果稳定，偏好性低，可有效降低片段化的时间和成本，摆脱了繁琐的超声步骤，让片段化过程变得更加简单高效。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 8 T | 24 T | 96 T |
12907 | Hieff ? Smearase | 80 μL | 240 μL | 960 μL |
运输与保存方法
冰袋运输。
-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 本试剂盒兼容范围为1 ng – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。
2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐，可能会影响后续实验，建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化，EDTA耐受范围为0-2 mM。
3. 对于常规的高质量基因组DNA，酶切时间参考表1。本试剂盒片段化偏好低，耐受各种GC含量的模板。
表1 常规基因组DNA片段化时间推荐表
插入片段主峰大小 | 片段化时间 | 优化范围 |
600 bp | 5 min | 3-10 min |
400 bp | 10 min | 8-15 min |
250 bp | 15 min | 10-20 min |
200 bp | 20 min | 12-25 min |
150 bp | 25 min | 20-30 min |
【注】：以上为推荐时间，需客户在自己的实验体系中进行微调，以达到最佳效果。
4. 参考表1片段化时间可将DNA酶切为所需大小，为保证优质稳定的片段化效果，片段化过程请于冰上操作。
5. 该酶在高温条件下即可失活。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
DNA片段化（DNA Fragment）
该步骤将基因组DNA片段化。
1. 将表2中试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于冰上配制表2反应体系。
表2 DNA片段化 PCR反应体系
名称 | 体积（μL） |
Input DNA | x |
Hieff ? Smearase | 10 |
ddH2O | Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表3所示反应程序，进行DNA片段化反应。
表3 DNA片段化 PCR反应程序
温度 | 时间 |
热盖105°C | On |
4 °C | 1 min* |
30 °C | 3-30 min** |
72 °C | 10 min |
4 °C | Hold |
【注】：*DNA片段化过程为有效控制片段化效果，避免过度酶切，反应程序可预先设置4℃，待模块温度降至4℃时，将PCR管放入PCR仪即可。**对于完整的基因组DNA，酶切时间参考表1。
5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS? DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。
参考实例
使用Hieff ? Smearase对Human gDNA样本进行酶切，片段化结果见图1。
图1 Hieff ? Smearase酶切200 ng Human gDNA样本（不同酶切时间片段化效果检测）
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