产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
2×Hieff? Robust PCR Master Mix (No Dye) | 10105ES50 | 1 mL | 1965.00 |
2×Hieff? Robust PCR Master Mix (No Dye) | 10105ES60 | 5×1 mL | 3265.00 |
产品描述
2×Hieff? Robust PCR Master Mix (No Dye)选用改造的Taq DNA Polymerase，添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲，扩增速度和扩增产量较普通PCR Mix有了质的飞跃。扩增速度可达15 sec/kb，适用于快速PCR反应，1 kb以内的极限扩增速度可达5 sec/kb，大幅节省PCR反应时间。预混液中含有dNTP、Mg2+，使用时只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤。中加入的保护剂使得 Master Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。本产品中不含染料，PCR产物需加入Loading buffer 后进行电泳。
PCR反应（推荐冰上配制）
组分 | 体积 | 终浓度 |
模板DNA | 适量 | - |
Primer正向 (10 μM) | 2.5 μL | 0.5 μM |
Primer反向 (10 μM) | 2.5 μL | 0.5 μM |
2×Hieff? Robust PCR Master Mix（No Dye） | 25 μL | 1× |
H2O | to 50 μL | - |
【注】：使用前请务必将其彻底混匀。
a）模板使用量：人基因组DNA：30-100 ng；大肠杆菌基因组DNA：10-100 ng；λDNA：0.5-5 ng；质粒DNA：0.1-10 ng。
b）Mg2+浓度：本产品中含有3 mM的MgCl2，适合大部分PCR反应。
PCR扩增条件
循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94 | 3-5 min | 1 |
变性 | 94 | 10 sec | 30-35 |
退火 | 55 | 20 sec |
延伸 | 72 | 15-30 sec/kb |
终延伸 | 72 | 5 min | 1 |
【注】：a）退火温度：请参考引物的理论Tm值，退火温度可设置低于引物理论值1-2℃。
b）延伸速度：长度1 kb以内的基因可选择5-15 sec/kb。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1）PCR反应需在冰上配制，混匀后快速置于PCR仪进行反应。
2）本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4）本产品仅作科研用途！
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