Hieff NGS? Tagment Index Kit for Illumina? (96 Index)
产品信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格（元） |
Hieff NGS? Tagment Index Kit for Illumina? (96 Index) | 12610ES96 | 96 T | 1365.00 |
产品描述
Hieff NGS? Tagment Index Kit for Illumina?是Hieff NGS? Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina?专用配套试剂盒。其中包含8种N5XX以及12种N7XX，可用于96种不同的双端Index文库制备。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。
产品组分
| 组分 | Cat#12610（96 rxn） | 测序时Index序列 | Index名称 |
N5XX | N501 | 24 μL | TAGATCGC | Index 2（i5） |
N502 | 24 μL | CTCTCTAT |
N503 | 24 μL | TATCCTCT |
N504 | 24 μL | AGAGTAGA |
N505 | 24 μL | GTAAGGAG |
N506 | 24 μL | ACTGCATA |
N507 | 24 μL | AAGGAGTA |
N508 | 24 μL | CTAAGCCT |
N7XX | N701 | 16 μL | TAAGGCGA | Index 1（i7） |
N702 | 16 μL | CGTACTAG |
N703 | 16 μL | AGGCAGAA |
N704 | 16 μL | TCCTGAGC |
N705 | 16 μL | GGACTCCT |
N706 | 16 μL | TAGGCATG |
N707 | 16 μL | CTCTCTAC |
N708 | 16 μL | CAGAGAGG |
N709 | 16 μL | GCTACGCT |
N710 | 16 μL | CGAGGCTG |
N711 | 16 μL | AAGAGGCA |
N712 | 16 μL | GTAGAGGA |
储存及有效期
冰袋运输。
所有组分-20℃贮存，有效期一年。
其他必需材料
Hieff NGS? Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina? (Cat#12206 / Cat#12207)
适用范围
Hieff NGS? Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina?专用配套试剂盒，可用于96种不同的双端Index文库制备。
质量控制
16小时孵育检测：50 μL 反应体系中包含5 μL Oligos和1 μg HindIII-λDNA，37 ℃下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条带无降解；
50 μL反应体系中包含5 μL Oligos和1 μg T3 DNA，37 ℃下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条带
无降解。
核酸内切酶残留：50 μL反应体系中加入5 μL Oligos和1 μg φX174 RF I DNA，37 ℃下孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，RF II转化比率＜10%。
Index选择策略
Illumina使用绿色荧光标记dG/dT，使用红色荧光标记dC/dA。为了保证测序能顺利进行，每个循环里绿色和红色两种荧光信号都必须存在。因此在选择Index时需要考虑绿色信号和红色信号的平衡。下面为推荐的一些Index组合：
表1 Index 选择策略
样品数量 | N7XX选择[Index 1(i7)] | N5XX选择[Index 2(i5)] |
1 | 任意N7XX | 任意N5XX |
2 | 选择1：N701和N702 | 任意N5XX |
选择2：N702和N704 | 任意N5XX |
3 | 选择1：N701、N702和N704 | 任意N5XX |
选择2：N703、N705和N706 | 任意N5XX |
4-5 | 选择1：N701、N702、N704及其他任意N7XX | 任意N5XX |
选择2：N703、N705、N706及其他任意N7XX | 任意N5XX |
6 | N701、N702、N703、N704、N705和N706 | 任意N5XX |
7-12 | 选择1：N701-N706及其他任意N7XX | 任意N5XX |
选择2：N701、N702、N704及其他任意N7XX | 选择1：N501和N502 |
选择2：N503和N504 |
选择3：N505和N506 |
选择3：N703、N705、N706及其他任意N7XX | 选择1：N501和N502 |
选择2：N503和N504 |
选择3：N505和N506 |
>12 | N701-N706及其他任意N7XX | 选择1：N501、N502及其他任意N5XX |
选择2：N503、N504及其他任意N5XX |
选择3：N505、N506及其他任意N5XX |
上表仅是一些可以进行测序的Index组合实例，在实际使用过程中也可根据下图示意自行选择适合的index组合.
表2 Index 选择实例
正确选择实例 | 错误选择实例 |
样品 数量 | 样品 编号 | N7XX [Index 1 (i7)] | N5XX [Index 2 (i5)] | 样品 数量 | 样品 编号 | N7XX [Index 1 (i7)] | N5XX [Index 2 (i5)] |
4 | 1 N705 GGACTCCT N503 TATCCTCT | 4 | 1 N705 GGACTCCT N502 CTCTCTAT |
2 N706 TAGGCATG N503 TATCCTCT | 2 N706 TAGGCATG N502 CTCTCTAT |
3 N707 TAAGGCGA N504 AGAGTAGA | 3 N707 TAAGGCGA N503 TATCCTCT |
4 N708 CGTACTAG N504 AGAGTAGA | 4 N708 CGTACTAG N503 TATCCTCT |
√ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ | √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ × ×× × |
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√: 测序时绿色通道和红色通道都有信号 ×: 测序时只有绿色通道有信号或只有红色通道有信号。
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