X5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase
PCR mix (2X)使用说明书
产品名称 单位 货号
X5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) 1 ml MF008-01
X5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) 5x1 ml MF008-05
X5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) 10x1 ml MF008-10
【储存条件】
长期保存,请置于-20?C,有效期24个月。经常使用,可置于4?C保存至少六个月。
【产品简介】
本产品包含高纯度X5 HiPer High-Fidelity DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。X5 HiPer High-Fidelity DNA 聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%)具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的3’端没有突出的"A"碱基,纯化后可用聚合美平末端载体克隆(货号MF021或MF022)。 本产品有含红色染料,在PCR 反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与300 bp 双链DNA 片段相近。
【产品组份】
X5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) 1 ml
ddH2O 1ml
【适用范围】
1.基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
2.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物,如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析(SNP)等。
【所需试剂】使用者仅需准备PCR反应的模板、引物和蒸馏水等。
【操作示例】 |
按下表配制PCR反应体系(冰上操作): |
Template DNA* | <1μg |
X5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) | 10 μl |
Primer 1 (10 μM) | 0.5 μl |
Primer 2 (10 μM) | 0.5 μl |
ddH2O补足至 | 20 μl |
建议的PCR条件: | |
95°C | 3 min. |
32-36 cycles of: | |
94°C | 25 sec. |
53–64°C | 25 sec. |
68°C | 15-30sec./1kb |
68°C | 5 min. |
保持 4°C forever | |
<*模板量:10~1000 ng 基因组 DNA,1~30 ng 质粒,或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系>。
注意:设置退火温度时,X5超保真酶为Tm+3,不是Taq酶的Tm-5!
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。