11208Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES03 | 1 mL | 1365.00 |
Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES08 | 5 mL | 5565.00 |
Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES60 | 20×5 mL | 91265.00 |
产品描述
本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 |
11208ES03（1 mL） | 11208ES08（5 mL） |
11208-A | 2×Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix | 1 mL | 1 mL × 5 |
11208-B | 50×Low Rox | 40 μL | 200 μL |
11208-C | 50×High Rox | 40 μL | 200 μL |
运输与保存方式
冰袋运输，-20℃储存；有效期18个月。
反应体系
反应组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix | 10 | 1× |
Primer Mix | x | 0.1-1 μM |
TaqMan Probe Mix | y | 50 nM-300 nM |
50×High or Low Rox | 0.4 | 1× |
模板DNA/cDNA | 1-100 ng | - |
ddH2O | up to 20 | - |
【注】：1）上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量，可根据具体实验情况进行调整，选择最适投入量和浓度；
2）一般情况下，每条引物浓度为0.2 μM即可得到较好的扩增效果，引物浓度可在0.1-1 μM的范围内进行调节；
3）反应体系可根据实验需求进行等比例调节，模板体积不超过总体积的1/10。
扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 5 s | 40 |
退火/延伸 | 60℃ | 30 s |
【注】：1）某些情况下，可通过调节退火延伸时间提高多重qPCR反应的性能。
2）反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性。
注意事项
一、关于操作
1）请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后置于冰上备用。
2）为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3）使用过程中避免产品的反复冻融。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
二、实验方法
a：引物设计
1. 引物必须具有特异性。
2. 引物的Tm值必须在58-60℃，而且各组引物的Tm差异应控制在1-2℃。
3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
b：探针设计
1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10℃（68-70℃）。
2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
实验案例
检测HEK293T细胞A1、A2、A3、A4基因10倍梯度浓度扩增。
一、反应体系配制
反应组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix | 10 | 1× |
Primer Mix | 0.5 | 250 nM |
TaqMan Probe Mix | 0.5 | 250 nM |
50×High or Low Rox | 0.4 | 1× |
HEK293T细胞基因组 | 0.2 ng~200 ng | - |
ddH2O | up to 20 | - |
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格（元） | 促销价（元） |
Hifair? II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix | 11120ES60 | 100 T | 855 | - |
Hifair? II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus) HOT | 11123ES60 | 100 T | 955 | - |
Hifair? qPCR SYBR? Green Master Mix (No Rox )HOT | 11201ES08 | 5 mL | 740 | 498 |
Hifair? qPCR SYBR? Green Master Mix (Low Rox Plus) HOT | 11202ES08 | 5 mL | 740 | 498 |
Hifair? qPCR SYBR? Green Master Mix (High Rox Plus) HOT | 11203ES08 | 5 mL | 740 | 498 |
Hieff UNICON? qPCR TaqMan Probe Master Mix | 11205ES08 | 5 mL | 740 | - |
HB190829