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DL121-01 | 酵母基因组DNA快速提取试剂盒 | 50次 | 610 | {/else}暂无 |
保存条件:本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。蛋白酶K可室温运输,建议-20℃长期保存。
产品介绍:
该试剂盒采用DNA吸附柱和独有的溶液系统,适合于从多种来源的酵母培养物中快速简单地提取基因组DNA。酵母细胞经lyticase处理去除细胞壁后,独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。纯化的DNA产物可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。
菌体浓度检测:可采用分光光度计或平板培养法检测菌体量,一般对于酿酒酵母,OD600值为1.0时,相当于1-2×107 cells/ml。
产品特点:
1. 重复性好:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.提取纯度高,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
3.简单快捷,操作安全。
注意事项:
1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.结合液CB 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3.为避免降低活性,方便运输,提供Lyticase(2500U)为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入0.25毫升灭菌水溶解配制成10U/μl,反复冻融可能会降低酶活性,可酌情分装-20℃保存。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化。
5.Sorbitol buffer( 1M 山梨醇, 0.1M Na2EDTA,14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法:称取182.2g山梨醇溶于600ml去离子水中,加入200ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ,定容至1L,溶液4℃保存。临用前加入β-巯基乙醇至0.1% 浓度(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游 酶切反应,使用时可以适当稀释。
自备试剂:无水乙醇、Sorbitol buffer、β-巯基乙醇
(具体操作详见说明书)