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CZ101-01 | 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒(磁珠法) | 100次 | 560 | {/else}暂无 |
CZ101-02 | 200次 | 960 |
保存条件:
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒(100次磁珠法)
产品介绍:
琼脂糖凝胶电泳是一种用于分离纯化DNA片段的重要分子生物学实验技术。本试剂盒中的溶胶液可以溶解由TAE或TBE电泳缓冲液制备的琼脂糖凝胶块,从凝胶块中溶解的DNA片段可以特异性地吸附到硅基化磁珠的表面,在磁场的作用下,携带DNA的磁珠向磁铁方法进行定向移动和聚集,与剩余的其它杂质完全分开。通过简单的两次洗涤,可以将杂质完全洗尽。最后用水或低盐缓冲液将结合在磁珠上的DNA洗脱下来,纯化的DNA可用于测序、酶切、标记和克隆等多种下游实验。该试剂盒可与核酸提取仪等工作站配套使用,可以简单、快速地进行大规模核酸提取,达到降低工作量和提高工作效率的目的。
产品特点:
1.磁珠之间吸附量差异极小,可重复性好。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不影响后续下游实验。
3.溶胶液为黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
注意事项:
1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。使用前应该恢复到室温。
2.Magbead磁珠严禁冷冻。使用前一定要涡旋震荡,充分重悬。除Magbead磁珠外其它组分储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
4.电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳效果和回收效果。
5.溶胶液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
6.回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间,过长、过短片段的回收效率降低。7.回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有关。一般1-20μg,100bp-5kb的DNA片段,回率可高达85%-95%。
7.pH值≤7.5时,吸附膜吸附DNA的效率最高。如果切下来的凝胶中含有电泳缓冲液太多,造成溶胶后溶胶液pH偏高,会导致回收率降低。溶胶后,如果溶胶液依旧保持黄色,说明pH正常;如果变成橘红色或者淡紫色,说明pH偏高,可在胶充分溶解后加5-10μl 3M醋酸钠(pH5.2)将pH值调到5-7(黄色)。
8.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,DNA片段应该保存在-20℃。DNA片段如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
自备仪器及试剂:
小型离心机、水浴或金属浴加热块、磁力架(博迈德)、震荡器、无水乙醇
(具体操作详见说明书)