类胰岛素生长因子结合蛋白3测定试剂盒
【产品名称】
通用名称：类胰岛素生长因子结合蛋白3测定试剂盒（酶联免疫吸附法）
英文名称：IGFBP-3 ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
试剂盒用于体外定量测定人血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）的含量。
【前言简介】
胰岛素样生长因子（IGF）系统是正常体内生长和再生的主要调节因子，影响细胞增殖，分化和细胞凋亡。 此外，IGF-系统似乎改变胰岛素敏感性和长期性葡萄糖代谢。 最后，许多流行病学，实验和临床资料表明，IGF-系统也涉及几种常见癌症的发展以及常见疾病如动脉粥样硬化和2型糖尿病等。
IGF家族由一系列密切相关的多肽组成，其包括两个主要促进生长的多肽，IGF-I和IGF-II，6种特异性高亲和力IGF结合蛋白（IGFBP-1至-6）和一个大的非IGF结合糖蛋白，“酸不稳定亚单位”（ALS）。
IGFBP-3是最丰富的IGF结合蛋白，占健康人循环IGF结合能力的75％以上。 IGFBP-3与IGFBP-5共享功能特性，因为两种肽都能与ALS和IGF-I或-II的形成高分子量约150千道尔顿的三元复合物。 然而，IGFBP-5循环浓度比IGFBP-3低得多，而在健康受试者中，三元复合物携带多达90％的IGFBP-3但只有约50％的IGFBP-5。
最初IGFBP被认为是IGF-载体蛋白，稳定血浆IGF水平并控制IGF从循环中流出至血管外隔室。此外，人们认为 IGFBP复合IGF在生物学上或多或少无活性，被剥夺了与IGF-1受体相互作用的能力。但是，很快人们就发现，在一些实验设置中，IGFBP激活而不是抑制IGF-I介导的作用，因此，IGFBP通常被称为IGF-1生物活性的调节剂。另外，大多数的IGFBP，特别是IGFBP-3，发挥着IGF-I和IGF-I受体的独立作用，可能涉及位于细胞表面和细胞内的特定受体间的相互作用。例如，IGFBP-3现在被认为是作为抗癌分子服务的，它可以明显防止几种常见的癌症，同时IGFBP-3在培养的脂肪细胞中对胰岛素信号的传导作用也被提出。
三元复合物的转换非常缓慢，一天中IGFBP-3的血浆浓度始终保持稳定，而不受短期营养变化的影响。 因此，IGFBP-3的水平可以由一个单独测量确定。 GH是IGFBP-3以及IGF-I和ALS的主要调节因子，因此，三种多肽水平在青春期生长期间增加，其后随着年龄的增长逐渐下降。 在儿童中，IGFBP-3已显示与24小时GH分泌相关，因此，IGFBP-3可能对儿童GH缺陷的诊断有帮助。
【检测原理】
GFBP3-ELISA是固相酶扩增敏感性对微孔板进行的免疫测定。标准品和样品与包被的捕获单克隆抗体（MAb 1）和用辣根过氧化物酶（HRP）标记的单克隆抗体（MAb 2）反应。经过孵育形成一个三明治结构：包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP，洗涤微孔板以除去未结合的酶标记抗体。通过显色测量结合的酶标记抗体反应。加入显色溶液（TMB）并孵育。添加终止液终止反应，然后在适当波长下读取微孔板。被测物含量的显色程度与人IGFBP3浓度成正比。绘制标准曲线，样品中IGFBP3浓度通过标准曲线可直接读取。
【试剂盒组成成分】
| 成分 | 规格（96T） | 状态 |
PLATE | 96孔微量滴定板，包被了IGFBP3（单克隆抗体） | 96孔 | 即用型 |
AbHRP CONC | 酶标记物浓缩液：HRP标记的抗IGFBP3（单抗），含procin和牛血清白蛋白的柠檬酸缓冲液 | 0.5ml*1瓶 | 用酶标记物缓冲液20倍稀释 |
CONJ BUF | 酶标记物缓冲液：含有牛血清白蛋白和百里酚的tris缓冲液 | 10ml*1瓶 | 即用型 |
CAL N | 标准品-N=1-5，含牛血清和百里酚的磷酸盐缓冲液。 瓶体标签上有具体浓度。 标准品都是预稀释过的，用稀释液做0标准品。 | 5瓶冻干粉 | 加入1ml蒸馏水 |
DIL BUF | 稀释液：含有牛血清，牛白蛋白和百里酚的磷酸盐缓冲液 | 100ml*1瓶 | 即用型 |
CONTROL N | 质控品N=1或2 ，含有人血清和百里酚，质控品是预稀释过的 | 2瓶冻干粉 | 加入1ml蒸馏水 |
WASH SOLN CONC | 洗涤液（tris-HCL） | 10ml*1瓶 | 蒸馏水200倍稀 释（使用电磁搅拌器） |
CHROM TMB | 底物液：TMB | 12ml*1瓶 | 即用型 |
STOP SOLN | 终止液：1.0N盐酸 | 12ml*1瓶 | 即用型 |