1、概述
ABR鱼腥藻毒素a检测试剂盒利用受体结合的原理。适用于定量或定性检测水样中鱼腥藻毒素a的含量。其他样品的提取步骤请与我公司联系。如果有必要阳性样品可以通过HPLC, GC/MS或其他的传统方法证实测定结果。
2、安全说明
标品中含有少量鱼腥藻毒素a,底物中含有四甲基联苯胺,终止液也含有稀硫酸。要避免接触到皮肤和粘膜。如果不小心接触了请用大量的水冲洗。
3、储存和稳定性
鱼腥藻毒素a检测试剂盒应该保存在4–8°C。在使用之前试剂盒中的试剂要恢复到室温(20-25°C)。试剂盒在有效期内可以使用。酶标物需要现配,配好的酶标物溶液只能在冰冻保存1周。
4、原理
试剂盒的原理是直接竞争ELISA法,通过特异性抗体来识鱼腥藻毒素a。当样品中含有鱼腥藻毒素a,样品中的鱼腥藻毒素a与鱼腥藻毒素a酶结合物竞争结合溶液中的鱼腥藻毒素a抗体。鱼腥藻毒素a抗体与包被在微孔板上的鼠二抗结合。经过一步洗涤加入底物溶液,产生有色反应。产生的绿色的颜色深度与样品中鱼腥藻毒素a的含量成反比。加入反应停止液后使颜色由蓝色转变为黄色。用酶标仪在450nm处测定吸光度值。通过绘制标准曲线来计算样品中鱼腥藻毒素a的含量。
5、鱼腥藻毒素a检测试剂盒的限制和可能的干扰
样品中的很多易出现的有机物和无机物已经被检测表明对试剂盒的检测没有干扰。然而由于样品中化合物的多变性引起的基质效应是不可能完全避免的。鱼腥藻毒素a在光照或者高pH条件下会降解,所以如果样品暴露在光照或者高pH条件会造成鱼腥藻毒素a含量偏低。后面有样品处理部分,可以先看看如何合理处理样品。在使用的过程中出现失误也会影响结果,比如:试剂盒保存条件不对、错误的加液顺序、试剂的量没有加准确、孵育的时间太长或太短、孵育的温度太高或太低(低于35°C或高于40°C),显色反应温度太高或太低(低于16°C或高于20°C)。和其它检测方法一样对阳性结果要求通过其它传统的方法来验证。
6、鱼腥藻毒素a检测的重要性
鱼腥藻毒素a是由蓝藻产生的生物碱神经毒素。在蓝藻毒素中是最毒的一种。人或者动物体内的肌肉神经接点是鱼腥藻毒素a的一个靶标(鱼腥藻毒素a也能穿过血脑屏障),肌肉神经接点把信息从突触前的神经终端传达到突触后的肌肉,同时乙酰胆碱会释放出来,激活肌肉的乙酰胆碱受体,激发一系列的事件是肌肉收缩。大部分的乙酰胆碱会被肌肉神经接点处的乙酰胆碱酯酶分解。鱼腥藻毒素a作为一种乙酰胆碱受体激动剂,效能是乙酰胆碱的20倍,但不能被乙酰胆碱酯酶分解,会使肌肉终板持续去极化,过度刺激肌肉,导致肌肉疲惫和麻痹。注射鱼腥藻毒素a5分钟,就会出现抽搐、心律失常、呼吸麻痹,最后窒息而死。
人和动物可能会注射含有鱼腥藻毒素a的针剂或者喝到含有鱼腥藻毒素a的水而中毒。鉴于此毒素的危害,很多国家已经开始对水中的鱼腥藻毒素a进行检测。新西兰规定鱼腥藻毒素a的最大可接受量为6.0ug/L。
鱼腥藻毒素a检测试剂盒可以检测43个样(双样),同时需要的样品量几个毫升,整个实验可以在3.5小时内完成。