1．产品概述
REAGEN? Vitamin B12 检测试剂盒操作简易，基于国标GB5413.14-2010研制。利用微生物方法，用于定量检测食品、药品和动物饲料中的维生素B12总量（包括添加和原生维生素B12）。所有所需的试剂均包含在试剂盒中。本试剂盒共能提供96次检测（包括标准品）,使用酶标仪 （610 - 630 nm 或者540 - 550 nm）进行读数。这个试剂盒相比市面上已有试剂盒具有以下特点：
l 样品前处理更加简便，能与其他维生素项目同时进行测定
l 试剂盒配备质控物质，利于实验质量
l 试剂盒配备各浓度标准品，实验过程无需另外配制
l 试剂盒稳定，高重复、高回收率。
2．试剂盒原理
维生素B12是从样品稀释提取所获得的。将稀释了的提取物和维生素B12检测培养基加入包被有Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis （leichmannii）的微孔中。Lactobacillus delbrueckii的生长状况取决于维生素B12的含量。添加维生素B12作为标准或者作为样品混合物，细菌会一直生长直至维生素B12被消耗殆尽。孵育条件应为黑暗、37 °C条件下孵育44 - 48小时。细菌生长时新陈代谢的强度和维生素B12的含量形成关系并可以绘制称成标准曲线，最后通过酶标仪在610 - 630 nm （或者540 - 550 nm）读取结果。
3、试剂盒组成
组成 | 规格 | 数量 |
微孔板 | 96孔，包被有德氏乳杆菌 | 1板 |
无菌水 | 30ml/瓶，用于培养基和标 准品制备及样品提取物稀 释 | 3瓶 |
维生素B12检测培养基 | 固体 | 3瓶 |
维生素B12标准品 | 固体 | 3瓶 |
粘合片 | 整片 | 2片 |
4、所需其他试剂及设备（不包含在试剂盒中）
1) 无菌操作台
2) 酶标仪：610-630nm或540-550nm
3) 培养箱：带暗室，37℃
4) 水浴锅：95℃
5) pH计
6) 离心机：大于8000g
7) 无菌枪头：20-200μL；100-1000μL
8) 无菌离心管：带螺帽，15和50mL
9) 无菌反应管：1.5或2.0mL
10) 玻璃瓶：500mL
11) 容量瓶：100和1000mL
12) 烧杯：100mL
13) 无菌注射器和0.2μm无菌滤膜
14) 无菌水或去离子水
15) HCl：1mol/和0.1mol/L
16) NaOH：1mol/和0.1mol/L
17) NaCN或KCN溶液：1%，100mg NaCN或KCN溶于10mL水中
18) 淀粉酶：z. B. Fluka86250
19) 醋酸盐缓冲液（pH4.5）：将0.66g无水醋酸钠加入100mL烧杯（含磁力搅拌棒）中，加入50mL 无菌水或去离子水，边搅拌边溶解，然后加入0.69mL 醋酸（> 99 %, 如 J. T. Baker 6052），使溶 液pH为4.5 ，必要时可用0.1mol/L HCl校正；将缓冲液定量转至100mL容量瓶中，用无菌水或去 离子水定容。2-8℃可储存1周。