试剂盒组成

试剂盒储存条件及稳定性

    试剂盒内组分室温保存即可，在适合的储存条件下该试剂盒未开封使用有效期为1年。

产品简介

   该试剂盒采用磁珠纯化方式，适合于从各种PCR产物或酶促反应液中高通量快速地回收100 bp~50 kb的DNA的片段，回收效率高达80%。能有效地去除PCR产物或酶促反应液中的寡聚核甘酸、引物二聚体、盐、蛋白质等污染。该系统操作简单，可以同绝大多数的核酸纯化仪相配合使用，整个操作流程可完全被自动化。转移PCR产物或酶促反应液至96孔板中，加入结合液/磁珠混合液，核酸被吸附到磁珠的表面，经磁场作用下分离，吸弃溶液去除杂质，经一步快速洗涤后，最后用灭菌水或者Elution Buffer洗脱出DNA即可，回收的DNA可直接用于酶切、测序、杂交、PCR反应等后续操作。

产品优势

1. 适合DNA的片段范围广：100 bp~50 kb；

2. 回收率高：回收率高达80%以上；

3. DNA纯度高：回收的PCR产物纯度高；

4. 操作快速简单：20 min即可完成整个操作流程，无需离心；

5. 可适用于自动化、高通量PCR产物纯化。

磁珠参数

    PCR产物纯化专用超顺磁磁珠，此款磁珠可在无锡百迈格生物科技有限公司购买（货号:BMS1000-2）。

操作步骤

自备试剂：

洗涤液：85% 乙醇；

洗脱液：Buffer EB（10 mM Tris-HCl，pH 8.0）或去离子水（pH在7.0~8.0之间）。

1. 充分混合震荡磁珠，使管内磁珠完全均匀悬浮起来。

2. 向样品管（可使用300 μL PCR管或96孔板）中加入待纯化的DNA样品溶液。

3. 取2.0×样品体积的磁珠溶液加入样品管中，漩涡震荡5秒后，室温静止结合5 min。

 注：放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀，以保证磁珠处于悬浮状态。

4. 将样品管置于磁力架上2min左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液枪吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。

5. 保持样品管在磁力架上，向管内慢慢加入300 μL 85%乙醇，保持样品管不离开磁力架以及磁珠团始终被吸附在管壁上，禁止分散开。

6. 将样品管置于磁力架上 2min左右或待磁珠被磁力架完全吸附，保持样品管在磁力架上静止，用移液枪吸取上清并弃掉，操作过程中避免触碰到磁珠团。

7. 重复步骤5~6，将管内的液体全部吸除干净。

8. 将样品管从磁力架上取出，于室温放置3~5 min，使残留乙醇充分挥发。

  注：避免真空干燥，磁珠过于干燥将会降低 DNA 洗脱效率。

9. 向管内加入20~100 μL洗脱液，并用移液枪轻轻吹打5-10次，使磁珠重悬混匀，操作过程中应避免产生气泡。

10. 室温放置5 min以充分洗脱。

  注：为了提高洗脱效率，放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀，以保证

      磁珠处于悬浮状态。

11. 将洗脱样品管放回磁力架上2 min或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。

12. 小心地将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中，在转移过程不要碰到磁珠，如出现磁珠悬起现象请重复步骤 11~12。